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GALANIN GAL2 (HUMAN) CELL LINE

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将 A431 细胞以 100,000 个细胞 / 孔的密度接种到 96 孔板中，在 37°C、5% 二氧化碳（CO₂）条件下孵育 24 小时。用浓度递增的过氧化氢（H₂O₂）处理细胞 10 分钟后，移除培养基，加入 50μL 补充后的 3 号裂解缓冲液，在室温（RT）下轻柔振荡，裂解细胞 30 分钟。取 16μL 裂解液转移至 384 孔小体积白色微孔板中，加入 4μL HTRF 磷酸化 c-Src 或总 c-Src 检测试剂，孵育 4 小时后记录 HTRF 信号。

在其他人类癌细胞系中的验证

在经培养处理的 96 孔板中，分别接种人肝癌 HepG2 细胞、人宫颈癌 HeLa 细胞和人乳腺癌 MCF-7 细胞。孵育后，加入 50μL 补充后的 3 号裂解缓冲液，在室温（RT）下轻柔振荡，裂解细胞 30 分钟。取 16μL 裂解液转移至 384 孔小体积白色微孔板中，加入 4μL HTRF 磷酸化 c-Src 或总 c-Src 检测试剂，孵育 4 小时后记录 HTRF 信号。

简化通路

c-Src 简化通路

c-Src 是一种膜相关非受体蛋白酪氨酸激酶，在所有细胞类型中均有广泛表达。该激酶在 Tyr530（酪氨酸 530）位点磷酸化时处于失活状态；而 Tyr530 位点去磷酸化后，再发生 Tyr419（酪氨酸 419）位点的自身磷酸化，是其完全激活的标志性事件。c-Src 主要由受体酪氨酸激酶（RTKs）、整合素和活性氧（ROS）激活，是调控多种信号通路（如 AKT、MAPKs、STATs 和 NF-κB 通路）的关键信号中介分子，可调节细胞增殖、分化、存活、形态、黏附和迁移过程。因此，Src 活性的精确调控对细胞正常生长至关重要。作为一种原癌基因衍生蛋白，c-Src 在许多人类癌症（如乳腺癌、结肠癌和胰腺癌）中存在过表达且活性高度上调的情况，使其成为癌症治疗中极具潜力的靶点。

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GALANIN GAL2 (HUMAN) CELL LINE

在其他人类癌细胞系中的验证

简化通路

c-Src 简化通路

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