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HTRF CYNOMOLGUS TNF A KIT - 10K PTS

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品牌： Revvity

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概述

肿瘤坏死因子 α（TNF-α）主要由活化的巨噬细胞产生，是急性期反应中的关键细胞因子之一。根据作用的细胞靶点及生物学背景不同，肿瘤坏死因子 α 可激活促凋亡通路或促存活通路，进而通过调控细胞凋亡参与组织发育过程。除肿瘤学和炎症领域外，肿瘤坏死因子 α 还会通过增加胰岛素抵抗、调节脂肪酸代谢，促进 2 型糖尿病的发生发展。

血清样本检测通常对灵敏度有更高要求。在部分情况下，AlphaLISA（阿尔法增强化学发光免疫分析技术）检测法的灵敏度足以实现对血清或血浆中低浓度分析物的检测。

作用机制

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中，使用均相时间分辨荧光（HTRF®）试剂进行检测（采用 384 孔低体积白色检测板或瑞孚迪（Revvity）低体积 96 孔检测板，最终反应体积为 20 微升）。标记有 HTRF 供体荧光团和受体荧光团的抗体可预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。通过按比例调整各试剂的添加体积，该检测可拓展至 1536 孔板检测规格。

（标注：Cytokines-how-it-works-assay-principle-cynomolgus-tnf-alpha-62ctnfapeg，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测数据分析

通常推荐采用四参数逻辑斯蒂（4PL）曲线对酶联免疫吸附试验（ELISA）的标准曲线进行拟合。与线性分析相比，该回归模型能在更宽的浓度范围内实现对未知样本的准确定量，因此非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

检测详情

食蟹猴肿瘤坏死因子 α 检测技术规格

规格项目	具体参数
样本量	16 微升（µL）
最终检测体积	20 微升（µL）
试剂盒组成	冻干标准品、冷冻保存的检测抗体、缓冲液及检测说明书
检测限（LOD）与定量限（LOQ）（在稀释液中）	12.4 皮克 / 毫升（pg/mL）、27 皮克 / 毫升（pg/mL）
检测范围	27–3000 皮克 / 毫升（pg/mL）
结果获取时间	室温（RT）下过夜（ON）
适用物种	仅食蟹猴

分析性能

批内与批间精密度（一）

样本	肿瘤坏死因子 α（TNF-α）平均浓度（pg/mL）	变异系数（CV）
1	100	14%
2	1500	2%
3	2750	2%
-	平均变异系数	6%

注：对 3 个样本分别进行 24 次检测，并计算每个样本的变异系数（% CV）。

批内与批间精密度（二）

样本	肿瘤坏死因子 α（TNF-α）浓度（pg/mL）	差值比（delta R）均值	变异系数（CV）
1	159	665	3%
2	514	2150	2%
3	1667	6467	2%
-	-	-	平均变异系数 2%

注：在 4 次独立实验中分别对每个样本进行检测，并计算每个样本的变异系数（% CV）。