产品概述

α- 微管蛋白（Alpha-Tubulin）是微管蛋白超家族成员，与 β- 微管蛋白聚合形成微管 —— 真核细胞骨架的主要组成部分。微管参与多种细胞过程，如结构支撑、细胞内运输和 DNA 分离。α- 微管蛋白 K40 位乙酰化（Alpha-Tubulin K40 acetylation）已被证实可影响微管蛋白自组装，并保护微管免受应激诱导的材料疲劳。该 α- 微管蛋白乙酰化 K40 试剂盒专为定量检测细胞裂解液中 K40 位乙酰化的 α- 微管蛋白设计。

工作原理

检测原理

α- 微管蛋白乙酰化 K40 的检测采用夹心免疫分析技术，涉及两种特异性抗 α- 微管蛋白抗体：一种标记铕穴状化合物（Europium Cryptate，供体），另一种标记 d2（受体）。信号强度与样本中 K40 位乙酰化 α- 微管蛋白的浓度呈正比。（标注：1biomarkers-how-it-works-assay-principle-alpha-tubullin-63adk072peg-63adk072peh.svg 为图表标识，对应 “α- 微管蛋白乙酰化 K40 检测原理”）

检测流程

α- 微管蛋白乙酰化 K40 检测采用双板实验方案：细胞在同一 96 孔培养板中接种、刺激并裂解，随后将裂解液转移至检测板，使用 HTRF 试剂检测 α- 微管蛋白乙酰化 K40。该方案可监测细胞活力与汇合度。标记 HTRF 荧光团的抗体可预先混合，单次加样简化流程，按比例调整试剂体积即可适配 96 孔至 384 孔板格式。（标注：2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-alpha-tubulin-63adk072peg-63adk072peh.svg 为图表标识，对应 “α- 微管蛋白乙酰化 K40 检测流程”）

检测验证

TSA 和 Tubacin 对 NIH 3T3 细胞的作用

将 12,500 个 NIH/3T3 细胞接种于 96 孔板，过夜孵育后，用相关化合物在 37°C、CO₂环境下处理 16 小时。移除上清液后加入裂解缓冲液，振荡 30 分钟制备裂解液，随后将裂解液转移至 384 孔板进行检测。结果显示，组蛋白去乙酰化酶强效抑制剂曲古抑菌素 A（TSA）和 HDAC6 选择性抑制剂 Tubacin，可提高 NIH/3T3 细胞中 α- 微管蛋白 K40 位的乙酰化水平。（标注：3assay-validation-tubulin-63adk072peg.svg 为图表标识，对应 “TSA 和 Tubacin 作用验证结果”）

产品规格

• 应用领域：蛋白定量（Protein Quantification）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 分子修饰类型：乙酰化（Acetylation）
• 产品类别：试剂盒（Kit）
• 样本体积：16 µL
• 运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
• 靶标类别：生物标志物（Biomarkers）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 治疗领域：肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
• 单位规格：100,000 次检测（100,000 assay points）