β 淀粉样蛋白 1-40(Amyloid ß1-40)和 β 淀粉样蛋白 1-42(ß1-42)肽段与阿尔茨海默病症状的出现密切相关。这两种淀粉样蛋白肽段的产生受 β 分泌酶和 γ 分泌酶这两种酶的活性调控,这两种酶可切割淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein)。本试剂盒旨在检测细胞上清液或完整细胞中的 β 淀粉样蛋白 1-40 肽段。得益于 “加样即检测”(Add and Read)方法的便捷性,该检测可作为酶联免疫吸附测定(ELISA)的快速替代方案。
HTRF(均相时间分辨荧光)β 淀粉样蛋白 1-40 检测采用夹心免疫检测法,使用两种单克隆抗体,分别识别 β1-40 肽段上的不同表位。其中一种抗体用铕离子 - 穴状化合物(Eu³⁺-Cryptate)标记,另一种用 XL-665 荧光团标记。该检测既可用于完整细胞,也可用于细胞上清液。
β 淀粉样蛋白 1-40 检测的流程经过简化,仅需两步孵育操作:
- 目标化合物刺激细胞
- 使用 HTRF 试剂检测 β 淀粉样蛋白 1-40
标记有 HTRF 供体和受体的抗体可预先混合,通过单次加样步骤加入,以进一步加快检测流程。该方案中,细胞经刺激后需在 4℃条件下进行一次 24 小时的孵育。
- 检测限(Detection limit):13.64 皮克 / 毫升(pg/mL)
- 动态范围(Dynamic range):25 至 1600 皮克 / 毫升(pg/mL)
- 样本兼容性(Sample compatibility):细胞样本或细胞上清液
- 特异性(Specificity):与 β 淀粉样蛋白 1-42(Amyloid ß1-42)和 β 淀粉样蛋白 1-43(ß1-43)无交叉反应