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HTRF CORTISOL KIT - 500 PTS 皮质醇测量试剂盒-500测试

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概述

皮质醇（Cortisol），又称氢化可的松（Hydrocortisone），是由肾上腺皮质产生并分泌的主要糖皮质激素。它参与调节葡萄糖代谢、脂肪分解、血压水平及应激抑制过程。皮质醇还可扩散进入细胞内，其在细胞内的水平受 11β- 羟类固醇脱氢酶（1 型或 2 型，11ß-hydroxysteroid dehydrogenase, type 1 or 2）的严格调控。皮质醇检测试剂盒能够快速、准确地测定皮质醇含量，即便对于肝脏微粒体、完整细胞、动物血清等复杂样本也适用。该试剂盒还可用于评估 11β- 羟类固醇脱氢酶 1 型（11ß-HSD1）的活性（包括内源性、重组型或微粒体型活性）。

作用机制

检测原理

本试剂盒基于竞争法检测原理，涉及两种关键试剂：一种是用穴状化合物（Cryptate）标记的特异性抗体（供体），另一种是与 d2 分子偶联的皮质醇（受体）。细胞产生的皮质醇会与 d2 标记的皮质醇竞争结合抗皮质醇铕（Eu）穴状化合物单克隆抗体。

（标注：biomarkers-how-it-works-assay-principle-cortisol-62crtpeg-62crtpeh，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测方案

皮质醇检测试剂盒采用简化的检测流程，仅需两步孵育：

目标化合物对细胞的刺激；
使用均相时间分辨荧光（HTRF）试剂进行皮质醇检测。

该流程在细胞刺激后，仅需单次孵育 2 小时即可完成检测。

（标注：biomarkers-how-it-works-assay-protocol-cortisol-62crtpeg-62crtpeh，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测详情

核心特性

特性	具体参数
样本兼容性	血清、完整细胞、肝脏微粒体
检测限	70 皮克 / 毫升（pg/mL）（每孔 2 飞摩尔（fmol）皮质醇）
动态范围	0.1–100 纳克 / 毫升（ng/mL）
信号背景比（S/B）	>30
交叉反应性	可的松（Cortisone）：0.9%；皮质酮（Corticosterone）：7.0%；泼尼松龙（Prednisolone）：5.7%；孕酮（Progesterone）：2.7%；泼尼松（Prednisone）：<0.3%；睾酮（Testosterone）：<0.002%；脱氢表雄酮（DHEA）：<0.02%；地塞米松（Dexamethasone）：<0.0007%
Z' 因子（Z'）	检测体积为 20 微升（µL）时，Z' 因子 = 0.9（注：Z' 因子是评估检测方法稳健性的指标，越接近 1 表示方法越可靠）

（标注：specifications-cortisol-1，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测验证

微粒体中的皮质醇检测验证

本皮质醇试剂盒可准确测定复杂样本（如血清、细胞、微粒体制备物）中的氢化可的松含量。图 2 汇总了在低体积 384 孔板中，使用 HTRF 皮质醇试剂进行微粒体 11β- 羟类固醇脱氢酶 1 型（11ß-HSD1）检测的结果。已知的 11β- 羟类固醇脱氢酶 1 型抑制剂 —— 甘珀酸（Carbenoxolone）和甘草次酸（Glycyrrhetinic acid）可抑制可的松向皮质醇的转化，其半数抑制浓度（IC50）分别为 0.33 微摩尔 / 升（µM）和 0.31 微摩尔 / 升（µM）。

具体实验操作：在 384 孔低体积板中，用还原型辅酶 Ⅱ（NADPH，200 微摩尔 / 升）和可的松（160 纳摩尔 / 升）刺激微粒体 11β- 羟类固醇脱氢酶 1 型（浓度为 0.2 毫克 / 毫升），同时加入不同浓度的甘草次酸和甘珀酸抑制剂。

实验同时绘制了已知皮质醇浓度的标准曲线。将培养板在 37°C 下孵育 2 小时后，加入皮质醇 - d2 偶联物和铕离子（Eu³⁺）穴状化合物标记的抗皮质醇抗体。

加入试剂后，将培养板在室温下孵育 4 小时，随后在 620 纳米（nm）和 665 纳米（nm）波长下读取荧光发射值。

（标注：assay-validation-cortisol-1，为图表 / 文件标识，保留原文）

规格参数

其他规格

类别	详情
应用领域（Application）	蛋白质定量（Protein Quantification）
品牌（Brand）	HTRF（均相时间分辨荧光技术，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence 的缩写）
检测方式（Detection Modality）	HTRF
产品类别（Product Group）	试剂盒（Kit）
样本体积（Sample Volume）	10 微升（10 µL）
运输条件（Shipping Conditions）	常温运输（Shipped Ambient）
靶标类别（Target Class）	生物标志物（Biomarkers）
技术（Technology）	时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET，Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer）
治疗领域（Therapeutic Area）	代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）
单位规格（Unit Size）	500 个检测点（500 assay points）

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货号：62CRTPEG

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