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HTRF ESTRADIOL KIT - 10K PTS

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品牌： Revvity

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概述

大量研究表明，乳腺癌组织中含有合成雌二醇（17β- 雌二醇）所需的酶，而雌二醇这种类固醇激素在乳腺癌的发生发展中起着重要作用。乳腺癌组织中雌二醇的生成主要涉及两条途径：芳香化酶途径（将雄激素转化为雌激素）和硫酸酯酶途径（通过 17β- 羟类固醇脱氢酶 1（17ß-HSD1）将雌酮转化为雌二醇）。雌二醇检测试剂盒是一种高特异性的检测方法，可用于测定完整细胞、细胞上清液中的雌二醇，也可用于生化酶活性检测。

作用机制
检测原理
本试剂盒基于竞争法检测原理，涉及两种关键试剂：一种是用穴状化合物（Cryptate，荧光供体）标记的特异性抗体，另一种是与 XL665（荧光受体）偶联的雌二醇。细胞产生的雌二醇或纯化的 17β- 羟类固醇脱氢酶 1 会与 XL665 标记的雌二醇竞争结合抗雌二醇铕（Eu）穴状化合物单克隆抗体。

检测方案
雌二醇检测试剂盒采用简化的检测流程，仅需两步孵育操作：

目标化合物对细胞的刺激
使用均相时间分辨荧光（HTRF）试剂进行雌二醇检测

该流程在细胞刺激后，仅需单次孵育 2 小时即可完成检测。

检测详情
核心特性
检测限：0.02 纳克 / 毫升（ng/mL）
动态范围：0.02–20 纳克 / 毫升（ng/mL）
半数有效浓度（EC50）：0.8 纳克 / 毫升（ng/mL）
信号背景比（S/B）：14
特异性：雌酮 0.4%、雌三醇 0.3%、雌酮 - 3 - 硫酸酯 0.002%、睾酮 0.2%、孕酮 0.002%

检测验证
17β- 羟类固醇脱氢酶 1 活性检测
利用均相时间分辨荧光（HTRF）雌二醇检测试剂盒，检测了人乳腺癌细胞系 T-47D 在雌酮刺激下产生雌二醇的情况。细胞刺激后，直接向细胞培养板中加入检测试剂。如图 2 所示，即使仅使用 780 个细胞，也能检测到雌二醇。该均相时间分辨荧光雌二醇检测试剂盒可在不牺牲检测性能的前提下实现微型化并在单块板上进行检测，是筛选研究的理想工具。

具体实验操作：将 T-47D 细胞按指定数量接种到 96 孔半孔板中，加入 50 微升含 10 纳摩尔雌酮的 MEM 培养基，孵育 20 小时。直接向培养细胞中加入雌二醇检测试剂，孵育 2 小时后读取荧光信号，并利用标准曲线计算雌二醇浓度。

规格参数

其他规格
应用领域：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：试剂盒
样本体积：10 微升（10 µL）
运输条件：干冰运输
靶标类别：生物标志物
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：心血管疾病、代谢 / 糖尿病
单位规格：10,000 个检测点

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货号：62ESTPEH

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