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HTRF ACTIVE GLP1 KIT - 500 PTS GLP1检测试剂盒-500测试

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概述

活性胰高血糖素样肽 - 1（Active GLP-1），又称活性形式的胰高血糖素样肽 - 1（包括 GLP-1 (7-36) NH₂和 GLP-1 (7-37)），已成为 2 型糖尿病治疗中的关键生物标志物。GLP-1 的主要作用是刺激胰岛素分泌、抑制胰高血糖素分泌及减少食物摄入。在体内，这些活性形式会被二肽基肽酶 IV（DPP-IV）迅速降解为非活性形式（9-36）NH₂和（9-37）。活性 GLP-1 检测试剂盒旨在快速检测细胞上清液中的 GLP-1。

作用机制

检测原理

活性 GLP-1 的检测采用双抗体夹心免疫分析法，涉及两种抗体：一种用 Lumi4Tb - 穴状化合物（供体）标记，另一种用 d2（受体）标记。信号强度与样本中活性形式 GLP-1 的浓度成正比。

（标注：biomarkers-how-it-works-assay-principle-active，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测方案

活性 GLP-1 检测可在细胞上清液上进行，采用右侧所述的简单 “添加并读取” 流程（无需洗涤步骤）。HTRF 偶联物可预先混合，通过单次加样步骤加入，进一步简化流程。通过按比例调整各添加体积，检测可在 96 孔至 384 孔板中进行。本文所述的活性 GLP-1 检测方案使用白色 384 孔小体积板。

（标注：biomarkers-how-it-works-assay-protocol，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测详情

核心特性

项目	活性 GLP-1 具体参数
孵育条件	室温（RT）下过夜（ON）
线性范围	43.8–1400 皮克 / 毫升（pg/mL）
检测限	25 皮克 / 毫升（pg/mL）*
物种反应性	大鼠、小鼠、人、猪
肽段交叉反应性	GLP-1 (7-36) 酰胺：100%；GLP-1 (7-37)：98.04%；GLP-1 (1-36) 酰胺：0.39%；GLP-1 (1-37)：0.37%；GLP-1 (9-36) 酰胺：<0.01%；GLP-1 (7-17)：<0.01%；GLP-2：<0.01%；胰高血糖素：<0.01%

标准曲线

活性 GLP-1 标准曲线在 20 微升的最终检测体积中绘制，并在 Pherastar 仪器（BMG LABTECH）上读取。

* 注意：所有兼容 HTRF 的读数仪均可达到此灵敏度标准，但 SpectraMax M5e 和 FlexStation 除外。

（标注：specifications-active，为图表 / 文件标识，保留原文）

分析性能

HTRF 与 ELISA 检测格式的比较

如下所示，活性 GLP-1 检测与传统 ELISA 检测具有良好的相关性，同时操作更简便、节省时间。在白色 384 孔小体积板中，使用未经处理的 NCI-H176 细胞上清液对 HTRF 和 ELISA 检测 GLP-1 的效果进行了平行比较，相关系数为 0.97（n=6）。

HTRF 活性 GLP-1 检测	荧光 ELISA 检测
1 步混合并读取（无需洗涤）—— 检测时间 < 1 小时	6 个连续步骤 —— 检测时间 > 4 小时

（标注：analytical-performance-active-glp，为图表 / 文件标识，保留原文）

检测验证

稀释线性评估

使用 HTRF 检测稀释液对 NCI-H716 细胞上清液 1 和 2 进行稀释，然后测定未经处理的上清液及稀释样本（1:2、1:4、1:8、1:16）中的 GLP-1 浓度。右侧图表显示 3 次独立实验的平均值（± 标准差）。实测 GLP-1 浓度与预期浓度之间的强相关性表明，在检测范围内稀释具有线性。

（标注：assay-validation-active-glp，为图表 / 文件标识，保留原文）

NCI-H716 细胞中活性 GLP-1 分泌的葡萄糖剂量反应

测定人肠内分泌 NCI-H716 细胞在葡萄糖刺激后活性 GLP-1 分泌的时间曲线。将细胞（2×10⁵个细胞 / 孔）接种到预先用基质胶包被的 96 孔培养板中，用含 10% 胎牛血清（FBS）的 DMEM 培养基培养两天。实验当天，洗涤细胞后，在 100 微升含 DPP IV 抑制剂的 KRB 缓冲液中加入不同浓度的葡萄糖，孵育 2 小时。葡萄糖刺激结束后，将 10 微升上清液转移至 384 孔小体积板中，按照 “检测方案” 所述测定活性 GLP-1 水平。如预期所示，活性 GLP-1 的诱导具有葡萄糖剂量依赖性。10% 葡萄糖诱导的活性 GLP-1 最大幅度是基础分泌量的 2.1 倍。

（标注：assay-validation-active-glp，为图表 / 文件标识，保留原文）

规格参数

其他规格

类别	详情
应用领域（Application）	蛋白质定量（Protein Quantification）
品牌（Brand）	HTRF
检测方式（Detection Modality）	HTRF
产品类别（Product Group）	试剂盒（Kit）
样本体积（Sample Volume）	10 微升（10 µL）
运输条件（Shipping Conditions）	干冰运输（Shipped in Dry Ice）
靶标类别（Target Class）	生物标志物（Biomarkers）
技术（Technology）	TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移技术，Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer）
治疗领域（Therapeutic Area）	代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）
单位规格（Unit Size）	500 个检测点（500 assay points）

没有数据

货号：62GLPPEG

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