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HTRF HUMAN GRANZYME B KIT - 10K PTS 人颗粒酶B检测试剂盒-10,000测试

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品牌： Revvity

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概述

颗粒酶 B（也称为组织蛋白酶 G 样 1、细胞毒性 T 淋巴细胞蛋白酶 2、片段素 - 2、颗粒酶 - 2 或人类淋巴细胞蛋白）存在于细胞毒性淋巴细胞、自然杀伤（NK）细胞和细胞毒性 T 细胞中。它与穿孔素一同分泌，穿孔素会在细胞膜上形成孔隙，随后颗粒酶 B 进入靶细胞的细胞质，并通过激活半胱天冬酶触发细胞凋亡。

本试剂盒用于快速检测细胞上清液和全细胞中的人类颗粒酶 B。该检测方法可实现高通量检测，且无需任何洗涤步骤，与酶联免疫吸附试验（ELISA）相比节省了时间。

工作原理
检测原理
人类颗粒酶 B 检测采用双抗夹心免疫分析法，涉及两种特异性抗人类颗粒酶 B 抗体，分别标记有铕穴状化合物（供体）和 d2（受体）。信号强度与样品中颗粒酶 B 的浓度成正比。

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检测方案
右侧描述了使用 384 孔小体积白色板或 Revvity 小体积 96 孔板（最终体积 20 µL）的检测方案。直接向板中加入 16 µL 细胞上清液、样品或标准品，然后通过 HTRF 试剂进行检测。标记有 HTRF 供体和受体的抗体可预先混合，通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。只需按比例调整每次的加样体积，该检测即可在 96 孔至 384 孔板中进行。

biomarkers-how-it-works-assay-protocol-granzyme-b-62hgrzbpeg-62hgrzbpeh.svg

检测详情
颗粒酶 B 试剂盒的技术规格
样品量：16 µL
最终检测体积：20 µL
试剂盒组成：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限（LOD）和定量限（LOQ）（在稀释液中）：1.8 ng/mL 和 3.7 ng/mL
检测范围：3.7 – 1500 ng/mL
出结果时间：室温下过夜

分析性能
颗粒酶 B 标准曲线
按照试剂盒包装说明书中的步骤，将试剂盒提供的重组颗粒酶 B（标准品）在 5 号稀释液中进行系列稀释。以颗粒酶 B 浓度为横坐标，以 delta 比值表示的 HTRF 信号为纵坐标作图。

analytical-performance-human-granzyme-b-1.svg
精密度
批内检测（n=24）

样品	颗粒酶 B 平均值（pg/mL）	变异系数（CV）
1	644	14%
2	438	14%
3	23	18%
	平均变异系数	15%

每个样品测量 24 次，并计算每个样品的变异系数（% CV）。

批间检测（n=4）

样品	颗粒酶 B 浓度（pg/mL）	delta 比值平均值	变异系数（CV）
1	10	576	9%
2	54	2759	6%
3	652	18940	6%
		平均变异系数	7%

每个样品在 4 个不同的实验中进行测量，并计算每个样品的变异系数（% CV）。

检测验证
细胞上清液中颗粒酶 B 的检测（单板方案）
将不同细胞密度（4K 和 2K）的 TALL-104 细胞（效应细胞）与 K-562 细胞（靶细胞）共培养或不共培养，悬浮于 384 孔小体积微孔板中，体积为 16µL。细胞在 37°C、5% CO₂条件下孵育 16 小时。共培养后，加入 4 µL HTRF 颗粒酶 B 检测试剂。在室温下过夜孵育后记录 HTRF 信号。

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细胞上清液中颗粒酶 B 的检测（双板方案）
将不同细胞密度（50K 和 25K）的 TALL-104 细胞（效应细胞）悬浮接种于 96 孔板中，体积为 50µL。将 TALL-104 细胞与 K-562 细胞（靶细胞）共培养或不共培养，在 37°C、5% CO₂条件下孵育 16 小时。共培养后，将 16µL 细胞上清液转移至 384 孔小体积白色微孔板中，并加入 4 µL HTRF 颗粒酶 B 检测试剂。在室温下过夜孵育后记录 HTRF 信号。

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规格参数

其他规格参数
应用：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：生物标志物
靶标物种：人类
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：10,000 个检测点

没有数据

货号：62HGRZBPEH

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参考价格 ¥ 118105.25

产品规格

1盒/10000测试￥118105.25

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