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HTRF HISTAMINE DYN. KIT - 500 PTS 组胺检测试剂盒 - 500测试

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概述

组胺（1H - 咪唑 - 4 - 乙胺）是一种生物胺，已知在速发型超敏反应、炎症反应以及多种特应性疾病中发挥关键作用。作为机体对异体病原体免疫应答的一部分，组胺由嗜碱性粒细胞以及存在于邻近结缔组织中的肥大细胞产生。新鲜鱼类中氨基酸组氨酸经细菌脱羧作用会生成组胺，该组胺可作为指示细菌污染的健康风险生物标志物。本组胺检测试剂盒可精准定量外周血单个核细胞（PBMCs）及细胞样本中的组胺含量。

工作原理

检测原理

本试剂盒基于竞争法检测格式，涉及两种关键成分：一种是标记有穴状化合物（供体）的特异性抗体，另一种是偶联于 d2（受体）的组胺。细胞产生的组胺与 d2 标记的组胺竞争结合抗组胺铕穴状化合物（Eu Cryptate）单克隆抗体。

（配图说明：1biomarkers-how-it-works-assay-principle-histamine-62htmdpeg-62htmdpet.svg）

检测流程

本组胺检测方法采用简化流程，仅需两步孵育操作：

样本与酰化缓冲液、酰化试剂共同孵育；
使用 HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移）试剂进行组胺检测。
在酰化步骤之后，仅需单次 3 小时的孵育即可完成检测。

（配图说明：2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-histamine-62htmdpeg-62htmdpet.svg）

检测详情

核心特性

标准曲线范围：0.19 - 3000 nM
检测限（LoD）：0.21 nM
检测范围（LoD - 抑制率 90% 浓度 IC₉₀）：0.21 - 156 nM
特异性：
- 酰化组胺：100%（可特异性识别）
- 酰化 L - 组氨酸：＜0.00067%（交叉反应极低）
- 酰化血清素：＜0.0067%（交叉反应极低）

（配图说明：3specifications-histamine-dynamic-1.svg）

检测验证

变应原刺激后的组胺检测

实验使用 4 份独立血液样本（供体 A 至供体 D），分别检测组胺的自发释放量，以及经 5 种变应原混合物刺激后的释放量。这 5 种变应原混合物包括 6 种草属混合物、屋尘螨、猫上皮、吸入性变应原混合物及豚草常见变应原。

* 注：实验中用作阳性对照的抗 IgE 抗体（参考编号 #MABETS07）可单独购买。

（配图说明：4assay-validation-histamine-dynamic-1.svg）

RBL-2H3 细胞刺激后的组胺检测

培养大鼠嗜碱性粒细胞（RBL-2H3），分为加药组（含 2.5 μM 离子霉素，用于刺激组胺释放）和对照组（不含离子霉素）。通过裂解细胞测定总组胺含量，仅在培养基中培养细胞以评估组胺的自发释放量。按照标准 HTRF 组胺检测流程，在 37℃下对细胞刺激 30 分钟后进行组胺检测。

（配图说明：5assay-validation-histamine-dynamic-2.svg）

PBMC 刺激后的组胺检测

采用两名不同供体的人外周血嗜碱性粒细胞开展类似研究。比较离子霉素诱导的组胺非特异性释放，与抗 IgE 交联膜结合 IgE 受体诱导的组胺特异性脱颗粒释放。按照标准 HTRF 组胺检测流程，在 37℃下对外周血嗜碱性粒细胞刺激 30 分钟后进行组胺检测。误差线代表 3 次重复实验的标准差。

（配图说明：6assay-validation-histamine-dynamic-3.svg）

规格参数

其他规格：无详细信息（原文未提供）
应用领域：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移）
产品类别：试剂盒（Kit）
样本体积：6 μL
运输条件：常温运输
目标类别：生物标志物
技术类型：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移，Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer）
治疗领域：肿瘤学与炎症（领域）
单位规格：500 次检测用量

没有数据

货号：62HTMDPEG

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