研究人员在对胰岛素进行定量分析时面临的一个难题是,每次检测通常需要大量胰岛样本。本试剂盒专为提升灵敏度设计,适用于低浓度样本中的胰岛素定量,是检测小鼠胰岛基础胰岛素水平及胰岛素释放量的理想选择。
胰岛素检测采用双抗体夹心免疫分析法,所用两种单克隆抗体中,一种标记有穴状化合物(供体),另一种标记有 XL665(受体)。检测得到的荧光共振能量转移(FRET)信号强度与样本中胰岛素浓度呈正相关。
(配图说明:1biomarkers-how-it-works-assay-principle-insulin-high-range-62in1peg-62in1peh.svg)
取 10 微升(µL)细胞上清液,加入 5 微升受体标记抗体和 5 微升供体标记抗体(或加入 10 微升预混试剂,实现一步加样)。将混合液在室温(RT)下孵育 4 小时至过夜,随后在兼容 HTRF 技术的检测仪上读取检测结果。
(配图说明:2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-insulin-high-range-62in1peg-62in1peh.svg)
在小鼠胰岛上清液样本中,HTRF 超高灵敏度胰岛素检测法与主流放射免疫分析法(RIA)表现出极佳的相关性。该检测法的回归曲线斜率为 0.946,接近理想曲线,证明其检测结果具有高可靠性。
(配图说明:3-2specifications-insulin-ultra-sensitive-1.svg)
从 C57BL/6N 雄性小鼠体内分离胰岛,将胰岛分装到含 2.8 毫摩尔 / 升(mM)或 16.7 毫摩尔 / 升葡萄糖的 KRB 缓冲液试管中(每管 5 个胰岛,每个条件设 6 管)。孵育 10 分钟或 30 分钟后,收集上清液 *,使用 HTRF 超高灵敏度胰岛素试剂盒试剂测定胰岛素浓度。* 样本由法国蒙彼利埃功能基因组学研究所(IGF)“胰岛 β 细胞病理生理学” 研究团队的 S. Dalle(S・达勒)与 M. Ravier(M・拉维耶)提供。 (配图说明:4-2assay-validation-insulin-ultra-sensitive-1.svg、5-2assay-validation-insulin-ultra-sensitive-2.svg)
- 其他规格:无详细信息(原文未提供)
- 应用领域:蛋白质定量
- 品牌:HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移技术,Homogeneous Time-Resolved Fluorescence 缩写,此处为技术品牌标识)
- 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移技术)
- 产品类别:试剂盒(Kit)
- 样本体积:5 微升(µL)
- 运输条件:常温运输
- 目标类别:生物标志物(Biomarkers)
- 技术类型:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移技术,Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer 缩写)
- 治疗领域:代谢 / 糖尿病(Metabolism/Diabetes)
- 单位规格:500 次检测用量(500 assay points)