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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Biomarkers > HTRF INSULIN ULTRA SENS. KIT - 10K PTS 超级灵敏的胰岛素检测试剂盒-10,000测试

概述


研究人员在进行胰岛素定量检测时面临的一大难题是,每次检测通常需要大量胰岛样本。本试剂盒专为提升灵敏度设计,适用于低浓度样本中的胰岛素定量,是检测基础胰岛素水平及小鼠胰岛胰岛素释放量的理想选择。


工作原理

检测原理

胰岛素检测采用双抗体夹心免疫分析法,所用两种单克隆抗体中,一种标记有穴状化合物(供体),另一种标记有 XL665(受体)。检测获得的荧光共振能量转移(FRET)信号强度与样本中胰岛素浓度呈正相关。
(配图说明:1biomarkers-how-it-works-assay-principle-insulin-high-range-62in1peg-62in1peh.svg)

检测流程

取 10 微升(µL)细胞上清液,加入 5 微升受体标记抗体和 5 微升供体标记抗体(或加入 10 微升预混试剂,实现一步加样)。将混合液在室温(RT)下孵育 4 小时至过夜,随后在兼容 HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移)技术的检测仪上读取检测结果。
(配图说明:2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-insulin-high-range-62in1peg-62in1peh.svg)

检测详情

与主流放射免疫分析法(RIA)的相关性

在小鼠胰岛上清液样本中,HTRF 超高灵敏度胰岛素检测法与主流放射免疫分析法(RIA)表现出极佳的相关性。该检测法的回归曲线斜率为 0.946,接近理想曲线,证明其检测结果具有高可靠性。
(配图说明:3-2specifications-insulin-ultra-sensitive-1.svg)


检测验证

小鼠胰岛验证实验

从 C57BL/6N 雄性小鼠体内分离胰岛,将胰岛分装到含 2.8 毫摩尔 / 升(mM)或 16.7 毫摩尔 / 升葡萄糖的 KRB 缓冲液(克雷布斯 - 林格碳酸氢盐缓冲液)试管中(每管 5 个胰岛,每个条件设 6 管)。孵育 10 分钟或 30 分钟后,收集上清液 *,使用 HTRF 超高灵敏度胰岛素试剂盒试剂测定胰岛素浓度。* 样本由法国蒙彼利埃功能基因组学研究所(IGF)“胰岛 β 细胞病理生理学” 研究团队的 S. Dalle(S・达勒)与 M. Ravier(M・拉维耶)提供。
(配图说明:4-2assay-validation-insulin-ultra-sensitive-1.svg、5-2assay-validation-insulin-ultra-sensitive-2.svg)


规格参数


  • 其他规格:无相关详细信息(原文未提供)
  • 应用领域:蛋白质定量
  • 品牌:HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移技术,Homogeneous Time-Resolved Fluorescence 缩写,为该类检测常用技术品牌标识)
  • 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光共振能量转移技术)
  • 产品类别:试剂盒(Kit)
  • 样本体积:5 微升(µL)
  • 运输条件:常温运输
  • 目标类别:生物标志物(Biomarkers)
  • 技术类型:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移技术,Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer 缩写)
  • 治疗领域:代谢 / 糖尿病(Metabolism/Diabetes)
  • 单位规格:10,000 次检测用量(10,000 assay points)


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货号:62IN2PEH
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产品规格
  • 1盒/10000测试 ¥121503.96
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