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HTRF INSULIN MOUSE SERUM KIT - 5X200 PTS 小鼠胰岛素检测试剂盒 -5 x 200测试

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概述

多年来，研究人员一直致力于寻找一种理想的胰岛素检测方法，既要具备绝对特异性，又要兼顾灵敏度、准确性、低样本消耗量和易用性。如今，这一探索终于有了结果！本血清胰岛素检测试剂盒具有卓越的特异性和灵敏度，可可靠定量血清和血浆样本中的胰岛素。该检测基于真正的均相实验方案，无需任何洗涤或复杂的提取步骤，相比酶联免疫吸附试验（ELISA）能显著节省时间。

工作原理

检测原理

胰岛素检测采用双抗体夹心免疫分析法，所用两种单克隆抗体中，一种标记有穴状化合物（供体），另一种标记有 XL665（受体）。检测获得的荧光共振能量转移（FRET）信号强度与样本中胰岛素浓度呈正相关。

（配图说明：1biomarkers-how-it-works-assay-principle-insulin-high-range-62in1peg-62in1peh.svg）

检测流程

取 10 微升（µL）细胞上清液，加入 10 微升受体标记抗体和 5 微升供体标记抗体（或加入 15 微升预混试剂，实现一步加样）。将混合液在室温（RT）下孵育 4 小时至过夜，随后在兼容 HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移）技术的检测仪上读取检测结果。

（配图说明：2biomarkers-how-it-works-assay-protocol-insulin-high-range-62in1peg-62in1peh.svg）

检测详情

灵敏度

检测限定义为高于 0 号校准品两个标准差的数值。本 HTRF® 胰岛素检测试剂盒以英国国家生物制品检定所（NIBSC）国际标准品 66/304 为基准进行校准，得出以下等效关系：1 纳克（ng）HTRF® 胰岛素相当于 1 纳克 NIBSC 66/304 胰岛素（即：2.3×10⁻⁵国际单位（IU））。样本在室温下孵育过夜，该检测的线性范围为 0.24-8 纳克 / 毫升（ng/mL），测得的检测限为 0.064 纳克 / 毫升。

（配图说明：3-3specifications-insulin-mouse-serum-1.svg）

批内精密度

对 5 个小鼠血清样本进行检测，样本 1 的胰岛素平均浓度为 0.25ng/mL，变异系数（CV）为 7.6%；样本 2 平均浓度 0.73ng/mL，CV 为 3.7%；样本 3 平均浓度 0.9ng/mL，CV 为 5.4%；样本 4 平均浓度 2.84ng/mL，CV 为 4.6%；样本 5 平均浓度 5.17ng/mL，CV 为 4.0%。所有样本的平均变异系数为 5.1%。

批间精密度

对 5 个小鼠血清样本进行跨批次检测，样本 1 的胰岛素平均浓度为 0.37ng/mL，变异系数（CV）为 14.6%；样本 2 平均浓度 0.67ng/mL，CV 为 9.5%；样本 3 平均浓度 0.9ng/mL，CV 为 4.0%；样本 4 平均浓度 1.1ng/mL，CV 为 8.1%；样本 5 平均浓度 6.9ng/mL，CV 为 9.2%。所有样本的平均变异系数为 9.1%。

稀释线性

对 3 个小鼠血清样本进行不同倍数稀释检测：样本 1 稀释 2.5 倍时，预期浓度 0.388ng/mL，实测 0.368ng/mL，回收率 95%；稀释 5 倍时，预期 0.194ng/mL，实测 0.188ng/mL，回收率 97%。样本 2 稀释 2.5 倍时，预期 1.6ng/mL，实测 1.57ng/mL，回收率 98%；稀释 5 倍时，预期 0.8ng/mL，实测 0.9ng/mL，回收率 110%。样本 3 稀释 2.5 倍时，预期 2.84ng/mL，实测 3ng/mL，回收率 105%；稀释 5 倍时，预期 1.42ng/mL，实测 1.66ng/mL，回收率 117%。所有样本的平均回收率为 103.7%。

加标回收率

对 3 个小鼠血清样本进行加标检测：样本 1 加入 2.3ng/mL 胰岛素时，预期浓度 3.05ng/mL，实测 3.6ng/mL，回收率 118%；加入 4.8ng/mL 时，预期 5.55ng/mL，实测 6.4ng/mL，回收率 115%。样本 2 加入 2.4ng/mL 胰岛素时，预期 4.9ng/mL，实测 4.8ng/mL，回收率 98%；加入 4.8ng/mL 时，预期 7.3ng/mL，实测 8ng/mL，回收率 110%。样本 3 加入 0.8ng/mL 胰岛素时，预期 5ng/mL，实测 5.4ng/mL，回收率 108%；加入 1.6ng/mL 时，预期 5.8ng/mL，实测 6.2ng/mL，回收率 107%。所有样本的平均回收率为 109.3%。

与主流酶联免疫吸附试验（ELISA）的相关性

在胰岛素低滴度和高滴度血清样本中，HTRF 小鼠血清胰岛素检测法与主流的吸光度 ELISA 和化学发光 ELISA 均表现出极佳的相关性。其回归曲线斜率分别为 1.1 和 0.9，接近理想曲线，证明该检测方法具有高可靠性。

（配图说明：4-3specifications-insulin-mouse-serum-2.svg、5-3specifications-insulin-mouse-serum-3.svg）

检测验证

正常小鼠血清验证

将 C57BL/6J 小鼠随机分为两组，每组 7 只。一组小鼠禁食过夜，另一组正常喂养。处死小鼠后收集血液制备血清，使用 HTRF 小鼠血清胰岛素试剂盒试剂测定每个样本的胰岛素浓度。

（配图说明：6-3assay-validation-insulin-mouse-serum-1.svg）

糖尿病小鼠血浆验证

取一组 5 只 db/db 糖尿病雄性小鼠和一组 5 只 db/+ 对照雄性小鼠，禁食过夜。处死小鼠后，通过心脏穿刺收集血液，制备 K3 乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝血浆，使用 HTRF 小鼠血清胰岛素试剂盒试剂测定每个样本的胰岛素浓度。

（配图说明：7-3assay-validation-insulin-mouse-serum-2.svg）

肥胖小鼠血清验证

取一组 8 只 ob/ob 肥胖小鼠和一组 8 只 ob/+ 对照小鼠，处死小鼠后通过心脏穿刺收集血液制备血清，使用 HTRF 小鼠血清胰岛素试剂盒试剂测定每个样本的胰岛素浓度。

（配图说明：8-3assay-validation-insulin-mouse-serum-3.svg）

规格参数

其他规格：无相关详细信息（原文未提供）
应用领域：蛋白质定量
品牌：HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移技术，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence 缩写，为该类检测常用技术品牌标识）
检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移技术）
产品类别：试剂盒（Kit）
样本体积：5 微升（µL）
运输条件：常温运输
目标类别：生物标志物（Biomarkers）
目标物种：小鼠（Mouse）
技术类型：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移技术，Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer 缩写）
治疗领域：代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）
单位规格：1000 次检测用量（1,000 assay points）

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货号：62IN3PEB

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参考价格 ¥ 36674.27

产品规格

1盒/1000测试￥36674.27

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