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CCL5(C-C 基序趋化因子 5)又称 RANTES(活化调节正常 T 细胞表达和分泌因子),是主要由 T 淋巴细胞、巨噬细胞、血小板及某些肿瘤细胞分泌的趋化因子。RANTES 通过招募 T 细胞和巨噬细胞,在炎症部位发挥重要作用。当与白细胞介素 2(IL-2)和干扰素 γ(IFN-γ)共同分泌时,RANTES 还能诱导自然杀伤(NK)细胞的活化和增殖。其在肿瘤学中的功能尚不明确,但在感染性疾病中,RANTES 已被证实可抑制 HIV 入侵靶细胞。血清样本检测通常需要更高的灵敏度,AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以检测血清或血浆中低水平的分析物。
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板(384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板,终体积 20 µL),随后使用 HTRF 试剂进行检测。标记 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合,可通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。仅需按比例调整各试剂的添加体积,检测即可适配至 1536 孔板格式。(标注:cytokines-how-it-works-assay 为图表 / 文件标识,可译为 “细胞因子 - 人源 CCL5 检测原理”)
酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线拟合通常推荐使用 4 参数逻辑(4PL)曲线。与线性分析相比,该回归模型能在更宽的浓度范围内准确量化未知样本,非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。Revvity 已与Myassays.com合作,为你的数据分析提供支持。
将 PBMC 以 1×10⁵个 / 孔的密度接种到 96 孔板中,分别用 200 µg/mL 脂多糖(LPS)、10 ng/mL IL-1β 和 10 ng/mL TNF-α 刺激 24 小时。将上清液按 1:3 比例稀释,取 16 µL 稀释后的样本转移至 384 孔(低体积)白色检测板中,用人源 CCL5 检测试剂盒进行分析。(标注:assay-validation-human-ccl5 为图表 / 文件标识,可译为 “人源 CCL5 检测验证”)
将 LX2 细胞以 4×10⁵个 / 孔的密度接种到 6 孔板中,培养 3 天,饥饿处理 1 天后,用 0.5 ng/mL TGF-β 刺激 48 小时。取 16 µL 上清液转移至 384 孔(低体积)白色检测板中,用人源 CCL5 检测试剂盒进行分析。(标注:assay-validation-human-ccl5 为图表 / 文件标识,可译为 “人源 CCL5 检测验证”)