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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Cytokines > HTRF HP HUMAN IL1 BETA KIT - 500 PTS 人白细胞介素1β高性能检测试剂盒,500测试

概述

IL-1β 也称为白细胞热原或单核细胞因子,是 IL1 家族的促炎细胞因子。IL1 β 被认为是一种主要的内源性热原,可诱导前列腺素合成、T 细胞活化、B 细胞活化和随后的抗体产生。它也是 T 细胞分化为 Th17 的已知启动子。

血清样本的评估通常需要提高敏感性。在某些情况下,AlphaLISA 检测可能具有足够的灵敏度,能够检测血清或血浆中低水平的分析物。查看人 IL-1 AlphaLISA 试剂盒的分析性能了解更多信息,或了解有关 AlphaLISA 的更多信息。检测时,请始终遵循推荐的方案,避免使用高度溶血的样品。

规格

运输条件
以干冰运输
单位面积
10,000 个检测点


运作方式

检测原理

将细胞上清液、样品或标准品直接分配到检测板中,以便通过 HTRF® 试剂(384 孔低容量白板或 20 μl 的 Revvity 低容量 96 孔板)进行检测。用 HTRF 供体和受体标记的抗体经过预混合,并在单个分液步骤中添加,以进一步简化检测程序。只需按比例调整每个添加体积的大小,即可将分析运行至 1536 孔规格。

 

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检测数据分析

通常建议使用 4 参数 Logistic (4PL) 曲线拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比,这种回归能够在更广泛的浓度范围内准确测量未知样品,使其非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

为了充分了解如何处理 HTRF 数据处理以及 4PL 1/y² 拟合,

Revvity 还与 Myassays.com 合作,帮助您进行数据分析。您将能够访问免费的在线软件来运行 IL1 β 分析。

 

检测详情

人 IL-1β 标准曲线

IL-1β 标准曲线在试剂盒中提供的测定稀释剂 5 中生成。

 


 

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人 IL-1β 检测规格

 

样本量16 微升
最终检测体积20 微升
套件组件冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液和实验方案
LOD & LOQ (以稀释剂为单位)8.3 pg/mL & 18.8 pg/mL
LOD & LOQ (以DMEM+10%FCS为单位)11.3 & 26.7 pg/mL
LOD & LOQ (以RPMI+10%FCS为单位)15.3 & 28.5 pg/mL
范围75.8 – 6500 pg/mL
出结果时间RT 4 小时
对应 I.S.NIBSC (86/680) 值 (IU/mL) = 0.07 x HTRF hIL1ß 值 (pg/mL)
物种仅限人类

 

 

分析性能

测定内和测定间

批内 (n=24)

 

样本平均值 [IL-1ß] (pg/mL)简历
173.77%
2714.42%
33406.82%

平均 CV4%

 

对 3 个样品中的每个样品进行 24 次测量,并计算每个样品的 % CV。

 

批间 (n=4)

 

样本平均值 [IL-1ß] (pg/mL)简历
1769%
27028%
330954%

平均 CV7%

 

在 4 个不同的实验中测量每个样品,并计算每个样品的 % CV。

 

稀释线性

从这些实验中获得的出色回收率表明该分析具有良好的稀释线性。样品是用试剂盒 DIL5 稀释剂连续稀释的 PBMC 上清液。

 

抗原加标和恢复

将重组细胞因子添加到 PBMC 上清液样品中,并将测得的反应与计算的预期值进行比较。100% 的回收率表明样品和试剂盒标准品的细胞因子测量值相似。

 

交叉反应性

使用来自 IL-1 细胞因子家族的重组蛋白评估交叉反应性。测试高达 6 500 pg/mL 的蛋白质,并为每个蛋白质生成标准曲线。在检测标准曲线上对信号进行插值以内插浓度。该检测是人类特异性的,因为未检测到小鼠 IL-1β 细胞因子。

 

检测验证

调节 THP1 细胞系中人 IL-1β 的分泌

用 PMA 和 LPS 刺激 25 、 50 和 100 kcell/孔的 THP1 细胞 18 小时,分别使用 50 ng/mL 和 1 μg/mL。然后将 16 μL 上清液转移至白色检测板(384 小体积)中,用人 IL-1ß 检测试剂盒进行分析。

 

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LPS 刺激 PBMC 中 IL-1ß 分泌

以 50、100 和 200 kcell/孔接种的 PBMC 刺激 18 小时,LPS 浓度从 0.02 到 2 μg/mL 不等。然后将 16 μL 上清液转移至白色检测板(384 小体积)中,使用人 IL-1ß 检测试剂盒进行分析。

 

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地塞米松对 PBMC 诱导的 IL-1ß 释放的影响

用 0.2 μg/mL 的 LPS 刺激以 50 和 100 kcell/孔接种的 PBMC 18 小时,并用浓度递增的地塞米松(范围为 0.05 至 50 μg/mL)进行共处理。然后将 16 μL 上清液转移至白色检测板(384 小体积)中,使用人 IL-1ß 检测试剂盒进行分析。

 

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