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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Cytokines > HTRF HUMAN CCL5 KIT - 500 PTS 人的趋化因子CCL5测量试剂盒-500测试

概述


CCL5,也称为 RANTES(受活化调节、正常 T 细胞表达和分泌因子),是一种趋化因子,主要由 T 淋巴细胞、巨噬细胞、血小板和某些类型的肿瘤细胞分泌。RANTES 通过募集 T 细胞和巨噬细胞在炎症部位发挥重要作用。当与 IL-2 和 IFN-γ 一同分泌时,RANTES 还能诱导自然杀伤(NK)细胞的活化和增殖。RANTES 在肿瘤学中的作用尚不明确,但在感染性疾病中,已发现其可抑制 HIV 进入靶细胞。


血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法可能具备足够的灵敏度,能够检测出血清或血浆中低水平的分析物。


作用机制
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(采用 20μl 体系,384 孔低体积白板或 Revvity 96 孔低体积板)。预先混合标记有 HTRF 供体和受体的抗体,通过单次加样步骤加入,以进一步简化检测流程。通过按比例调整各添加体积,该检测可扩展至 1536 孔板格式。



检测数据分析
通常建议采用四参数 Logistic(4PL)曲线拟合酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能够在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。


Revvity 还与Myassays.com合作,为您的数据分析提供支持。


检测详情
人 CCL5 试剂盒技术规格


项目详情
样本量16μL
最终检测体积20μL
试剂盒组成冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
检测限与定量限(在稀释液中)7pg/mL 和 18pg/mL
检测范围18–2000pg/mL
出结果时间室温下过夜(ON @ RT)
校准国家生物标准与控制研究所(NIBSC)(92/520)值(IU/mL)=0.015×HTRF 人 CCL5 值(pg/mL)
适用物种仅人


分析性能
批内与批间检测

批内检测(n=24)

样本CCL5 平均浓度(pg/mL)变异系数(CV)
1747%
24177%
310446%

平均变异系数7%

批间检测(n=4)

样本CCL5 浓度(pg/mL)平均值(delta 比值)变异系数(CV)
16232012%
2256121413%
3100844055%


平均变异系数10%


检测验证
经脂多糖(LPS)、白细胞介素 1β(IL1β)和肿瘤坏死因子 α(TNFα)刺激的外周血单个核细胞(PBMC)中 CCL5 的分泌
将外周血单个核细胞以 100,000 个细胞 / 孔的密度接种到 96 孔板中,分别用 200μg/mL 的 LPS、10ng/mL 的 IL1β 和 10ng/mL 的 TNFα 刺激 24 小时。将上清液稀释至 1/3,取 16μL 稀释后的样本转移至 384 孔(SV)白色检测板中,用人 CCL5 检测试剂盒进行分析。


assay-validation-human-ccl5(标注:图表 / 文件标识,保留原文)


经转化生长因子 β(TGFβ)刺激的 LX2 细胞中 CCL5 的分泌
将 LX2 细胞以 400,000 个细胞 / 孔的密度接种到 6 孔板中,培养 3 天,饥饿处理 1 天后,用 0.5ng/ml 的 TGFβ 刺激 48 小时。随后,取 16μL 上清液转移至 384 孔(SV)白色检测板中,用人 CCL5 检测试剂盒进行分析。


assay-validation-human-ccl5(标注:图表 / 文件标识,保留原文)


规格参数

其他规格

类别详情
应用领域(Application)蛋白质定量(Protein Quantification)
品牌(Brand)HTRF
检测方式(Detection Modality)HTRF
产品类别(Product Group)试剂盒(Kit)
样本体积(Sample Volume)16μL
运输条件(Shipping Conditions)干冰运输(Shipped in Dry Ice)
靶标类别(Target Class)细胞因子(Cytokines)
靶标物种(Target Species)人(Human)
技术(Technology)TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移技术)
治疗领域(Therapeutic Area)代谢 / 糖尿病(Metabolism/Diabetes)、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化(NASH/Fibrosis)、肿瘤与炎症(Oncology & Inflammation)
单位规格(Unit Size)500 个检测点(500 assay points)


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