概述
GM-CSF(粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子)也被称为 CSF2(集落刺激因子 2),是一种造血生长因子和免疫调节剂。在免疫刺激条件下,它由 T 淋巴细胞、巨噬细胞、内皮细胞和成纤维细胞产生。其作用于骨髓中的前体细胞,启动其增殖并分化为成熟的粒细胞和巨噬细胞。GM-CSF 还能刺激多能祖细胞。
血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法可能具有足够的灵敏度,能够检测出血清或血浆中低水平的分析物。
工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(20 微升体积,可选用 384 孔低体积白色板或 Revvity 低体积 96 孔板)。将标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合,以单次加样的方式加入,从而进一步简化检测流程。该检测可扩展至 1536 孔板格式,只需按比例调整各加样体积即可。
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检测数据分析
通常建议使用四参数逻辑(4PL)曲线来拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能够在更广泛的浓度范围内准确测量未知样本,非常适合分析细胞因子释放等生物系统。
检测详情
人 GM-CSF 试剂盒技术规格
样本量:16 微升
最终检测体积:20 微升
试剂盒组件:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
检测限与定量限(在稀释液中):27 皮克 / 毫升和 47 皮克 / 毫升
检测范围:47-4500 皮克 / 毫升
出结果时间:室温下过夜
校准:NIBSC(09/136)值(国际单位 / 毫升)=0.07×HTRF 人 GCSF HTRF
适用物种:仅人类
分析性能
批内和批间检测
批内检测(n=24)
样本 | GM-CSF 均值(皮克 / 毫升) | 变异系数 |
---|
1 | 81 | 17% |
2 | 2125 | 4% |
3 | 6011 | 10% |
| 平均变异系数 | 10% |
批间检测(n=4)
样本 | GM-CSF 值(皮克 / 毫升) | 均值(delta 比率) | 变异系数 |
---|
1 | 169 | 370 | 6% |
2 | 774 | 1654 | 7% |
3 | 4135 | 5313 | 6% |
|
| 平均变异系数 | 7% |
检测验证
离子霉素和 PMA 共刺激 PBMC 分泌 GM-CSF
将 PBMC 以 100,000 个细胞 / 孔的密度接种于 96 孔板中,用 1 微克 / 毫升的离子霉素和不同浓度的 PMA 刺激 24 小时。将 16 微升的上清液转移至 384 孔(小体积)白色检测板中,使用人 GM-CSF 检测法进行分析。
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规格
其他规格
应用:蛋白质定量
品牌:HTRF
检测方式:HTRF
产品类别:试剂盒
样本体积:16 微升
运输条件:干冰运输
靶点类别:细胞因子
靶点物种:人类
技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
治疗领域:肿瘤学与炎症
单位规格:500 次检测点