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HTRF HUMAN IFN BETA KIT - 10K PTS 人的干扰素β测量试剂盒-10,000测试

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品牌： Revvity

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概述

I 型干扰素，包括干扰素 α（IFN-α）和干扰素 β（IFN-β），在针对病毒感染的先天免疫应答中发挥着关键作用。IFN-β 由成纤维细胞、巨噬细胞、树突状细胞以及内皮细胞产生。IFN-β 基因的表达受 IRF-3、c-Jun/ATF-2 和 NF-κB 等转录因子调控，这些转录因子位于 Toll 样受体等模式识别受体的下游。特别值得一提的是，IFN-β 是 cGas-cGAMP-STING 通路激活的主要功能性检测指标。IFN-β 分泌后，会结合并激活 IFNAR1/IFNAR2 受体复合物，这一过程依赖 STAT1/2 转录因子。磷酸化的 STAT1/2 会诱导抗病毒基因的表达。

血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中，使用 HTRF® 试剂进行检测（采用 384 孔小体积白色板或 Revvity 小体积 96 孔板，总反应体积为 20 µL）。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合后，通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。只需按比例调整各步加样体积，该检测即可适用于 1536 孔板格式。

ifn beta
检测数据分析
四参数逻辑（4PL）曲线通常被推荐用于拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比，这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

检测详情
人干扰素 β 试剂盒的技术规格
样本量：14 µL
最终检测体积：20 µL
试剂盒组成：冻干标准品、冷冻检测抗体、激活试剂、缓冲液及说明书
检测限（LOD）和定量限（LOQ）（在稀释液中）：7 pg/mL 和 19 pg/mL
检测范围：19 – 4,000 pg/mL
出结果时间：室温下 3 小时
校准：NIBSC（00/572）值（IU/ml）= 0.44 × HTRF 人 IFNβ 值（pg/ml）
适用物种：仅适用于人类

分析性能
批内和批间检测
批内检测（n=24）

样本	干扰素 β 平均值（pg/mL）	变异系数（CV）
1	33	4%
2	321	3%
3	3900	5%
	平均变异系数	4%

批间检测（n=4）

样本	干扰素 β 浓度（pg/mL）	delta 比值平均值	变异系数（CV）
1	62	374	10%
2	329	1628	7%
3	1739	5690	9%
		平均变异系数	9%

检测验证
cGAMP 激活 STING 通路可触发外周血单个核细胞（PBMC）释放人 IFNβ
将 400,000 个外周血单个核细胞接种到 96 孔板中，加入 100 µL 细胞培养基，然后用 50 µL 浓度为 67µM 的 cGAMP 进行刺激。过夜孵育后，将 14 µL 上清液转移至白色检测板中，通过 HTRF 法对人 IFNβ 进行定量检测。

assay validation - human ifn beta 1

脂多糖（LPS）可有效诱导 THP1 细胞释放人 IFNβ
将 400,000 个 THP1 细胞接种到 96 孔板中，体积为 100 µL，然后用 50 µL 浓度为 20 µg/ml 的 LPS 进行刺激。孵育 4.5 小时后，将 14 µL 上清液转移至白色检测板中，通过 HTRF 法对人 IFNβ 进行定量检测。

human ifn beta 2

表达组成型激活 STING 变体的重组 THP1 细胞可自发释放人 IFNβ
将 400,000 个 THP1-WT 细胞（野生型）和 THP1-S154 细胞（THP1-Dual™ KI-hSTING-S154 细胞，Invivogen 公司）接种到 96 孔板中，加入 100 µL 细胞培养基。刺激 4.5 小时后，将 14 µL 上清液转移至白色检测板中，通过 HTRF 法对人 IFNβ 进行定量检测。

assay validation - human ifn beta 3

双链 DNA 模拟物（CDS 激动剂）可诱导人 IFNβ 分泌
将 400,000 个 THP1-S154 细胞（THP1-Dual™ KI-hSTING-S154 细胞，Invivogen 公司）接种到 96 孔板中，加入 100 µL 细胞培养基，然后用双链 DNA 模拟物（CDS 激动剂–LyoVec，Invivogen 公司）处理。过夜孵育后，将 14 µL 上清液转移至白色检测板中，通过 HTRF 法对人 IFNβ 进行定量检测。

assay validation - human ifn beta 4

规格参数

其他规格参数
应用：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：试剂盒
样本体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：细胞因子
靶标物种：人类
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：肿瘤学与炎症
单位规格：10,000 个检测点

没有数据

货号：62HIFNBPEH

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参考价格 ¥ 154960.03

产品规格

1盒/10000测试￥154960.03

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