概述
白细胞介素 2(IL2)的主要作用是通过对 T 细胞的影响来调节细胞介导的免疫。IL2 促进 T 细胞分化为效应 T 细胞或记忆 T 细胞,从而帮助身体抵御感染。IL2 在免疫肿瘤学中也发挥关键作用,因为它是 T 细胞分化为调节性 T 细胞(Treg)的主要促进因子。
血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。
工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(采用 384 孔小体积白色板或 Cisbio 小体积 96 孔板,总反应体积为 20 µl)。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合后,通过单次加样步骤加入,以进一步简化检测流程。只需按比例调整各步加样体积,该检测即可适用于 1536 孔板格式。
IL2 试剂盒检测原理
检测数据分析
四参数逻辑(4PL)曲线通常被推荐用于拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。
检测详情
人 IL2 试剂盒的技术规格
样本量:16 µL
最终检测体积:20 µL
试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限(LOD)和定量限(LOQ)(在稀释液中):7 pg/mL 和 37 pg/mL
检测范围:37–8,000 pg/mL
出结果时间:室温下 3 小时
校准:NIBSC(86/500)值(IU/mL)= 0.01 × HTRF 人 IL2 值(pg/mL)
适用物种:仅适用于人类
分析性能
批内和批间检测
批内检测(n=24)
每个样本测量 24 次,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
批间检测(n=4)
每个样本在 4 个不同的实验中进行测量,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
检测验证
经抗 CD3 和抗 CD28 刺激的 Jurkat 细胞中 IL2 的分泌
将 Jurkat 细胞以 50 和 100 k 细胞 / 孔的密度接种,用分别制备为 10 µg/mL 和 1 µg/mL 的抗 CD3 和抗 CD28 刺激 24 小时。将 16 µL 上清液转移至白色检测板(384 孔小体积)中,用人 IL2 检测试剂盒进行分析。
经抗 CD3 和抗 CD28 刺激的 Jurkat 细胞中 IL2 的分泌。
抗 CD3 和抗 CD28 对 IL2 分泌的剂量反应效应
将 Jurkat 细胞以 200 k 细胞 / 孔的密度接种,用不同浓度的抗 CD3(0、0.5、1、10 µg/mL)和抗 CD28(0、1、5、10、20 µg/mL)刺激 24 小时。然后将 16 µL 上清液转移至白色检测板(384 孔小体积)中,用人 IL2 检测试剂盒进行分析。
抗 CD3 和抗 CD28 对 IL2 分泌的剂量反应效应。
规格参数
其他规格参数
应用:蛋白质定量
品牌:HTRF
检测方式:HTRF
产品类别:试剂盒
样本体积:16 µL
运输条件:干冰运输
靶标类别:细胞因子
靶标物种:人类
技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
治疗领域:神经科学、肿瘤学与炎症
单位规格:10,000 个检测点