概述
白细胞介素 4(IL4)由 T 细胞、自然杀伤(NK)细胞和肥大细胞表达,是体液免疫和适应性免疫的重要调节因子。它可刺激活化的 B 细胞,诱导其分化为浆细胞、发生免疫球蛋白 E 的类别转换,并促进 II 类主要组织相容性复合体(MHC)的表达。在免疫肿瘤学中,IL4 可诱导初始 T 细胞分化为辅助性 T 细胞 2(TH2 细胞),而 TH2 细胞又会产生 IL4,从而形成正反馈循环。此外,IL4 还参与气道炎症和过敏性哮喘的发生发展。
血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。
工作原理
检测原理
将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(采用 384 孔小体积白色板或 Revvity 小体积 96 孔板,总反应体积为 20 µl)。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合后,通过单次加样步骤加入,以进一步简化检测流程。只需按比例调整各步加样体积,该检测即可适用于 1536 孔板格式。
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检测数据分析
四参数逻辑(4PL)曲线通常被推荐用于拟合酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。
检测详情
人 IL4 试剂盒的技术规格
样本量:16 µL
最终检测体积:20 µL
试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限(LOD)和定量限(LOQ)(在稀释液中):8 pg/mL 和 29 pg/mL
检测范围:29–4,000 pg/mL
出结果时间:室温下 2 小时
校准:国家生物标准与控制研究所(NIBSC)(88/656)值(IU/mL)= 0.012 × HTRF 人 IL4 值(pg/mL)
适用物种:仅适用于人类
分析性能
批内和批间检测
批内检测(n=24)
每个样本测量 24 次,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
批间检测(n=4)
每个样本在 4 个不同的实验中进行测量,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
规格参数
其他规格参数
应用:蛋白质定量
品牌:HTRF
检测方式:HTRF
产品类别:试剂盒
样本体积:16 µL
运输条件:干冰运输
靶标类别:细胞因子
靶标物种:人类
技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
治疗领域:肿瘤学与炎症
单位规格:10,000 个检测点