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HTRF HUMAN IL6 KIT - 10K PTS 人的白介素6测量试剂盒-10,000测试

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概述

白细胞介素 6（IL6）是一种促炎细胞因子，参与急性期反应、炎症过程及癌症进展。它由 T 细胞、巨噬细胞和成纤维细胞分泌，可诱导 B 细胞和 T 细胞增殖。目前，IL6 的研究广泛覆盖多个领域，包括糖尿病、阿尔茨海默病、抑郁症以及多种癌症。此外，IL6 与转化生长因子 β（TGF-β）共同作为 T 细胞分化为辅助性 T 细胞 17（TH17 细胞）的主要促进因子，而 TH17 细胞是免疫肿瘤学领域的新研究方向之一。

血清样本的检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中，使用 HTRF® 试剂进行检测（采用 384 孔小体积白色板或 Revvity 小体积 96 孔板，总反应体积为 20 µl）。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合后，通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。只需按比例调整各步加样体积，该检测即可适用于 1536 孔板格式。

（标注：Assay principle human il6，即 “人 IL6 检测原理示意图”）

检测数据分析

四参数逻辑（4PL）曲线通常被推荐用于拟合酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线。与线性分析相比，这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本，因此非常适合分析细胞因子释放等生物系统。

检测详情

人 IL6 试剂盒技术规格

技术参数	具体规格
样本量	16 µL
最终检测体积	20 µL
试剂盒组成	冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）	8 pg/mL 和 34 pg/mL
检测范围	34–7,500 pg/mL
出结果时间	室温（RT）下 2 小时
校准方式	英国国家生物标准与控制研究所（NIBSC）（89/548）标准值（IU/mL）= 0.1 × HTRF 人 IL6 检测值（pg/mL）
适用物种	仅人类

分析性能

批内与批间检测

批内检测（n=24，n 为重复检测次数）

样本	IL6 平均值（pg/mL）	变异系数（CV）
1	384	5%
2	2522	3%
3	8594	3%
-	平均变异系数	4%

注：3 个样本各进行 24 次重复检测，并计算每个样本的变异系数（% CV）。

批间检测（n=4，n 为实验批次数量）

样本	IL6 浓度（pg/mL）	delta R 平均值	变异系数（CV）
1	116.5	400	13%
2	268	1805	10%
3	3261	7834	2%
-	-	平均变异系数	8%

注：每个样本在 4 个不同实验批次中分别检测，并计算每个样本的变异系数（% CV）；“delta R” 为荧光信号差值，是 HTRF 检测技术中的关键信号指标。

稀释线性

样本	稀释倍数	IL6 预期值（pg/mL）	IL6 检测值（pg/mL）	回收率
1	1	-	2015	-
	4.3	469	489	104%
	7.4	271	292	108%
	10.7	188	210	111%
	-	平均值	-	108%
2	1	-	354	-
	4.3	83	82	101%
	7.4	45	48	94%
	-	平均值	-	97%

注：这些实验中获得的优异回收率表明该检测具有良好的线性。

加标回收率

样本	加入的 IL6（pg/mL）	IL6 预期值（pg/mL）	IL6 检测值（pg/mL）	回收率
1	3250	4098	4103	100%

注：向血清样本中加入重组细胞因子，将标准曲线得到的响应值与计算出的预期值进行比较。观察到的 100% 回收率验证了本检测所用的样本基质（即血清）的适用性。

检测验证

JTE607 抑制 THP1 细胞分泌 IL6

将 THP1 细胞以 100 k 细胞 / 孔的密度接种，在含 2 µg/mL 脂多糖（LPS）的条件下，用不同浓度的 JTE607 孵育 18 小时。随后将 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔小体积）中，通过人 IL6 检测试剂盒进行分析。

（标注：assay validation human il6，即 “人 IL6 检测验证示意图 1”）

脂多糖（LPS）刺激外周血单个核细胞（PBMC）分泌 IL6

将外周血单个核细胞以 50、100 和 400 k 细胞 / 孔的密度接种，用不同浓度的脂多糖（0、0.02、0.2、2 µg/mL）刺激 18 小时。随后将 16 µL 上清液转移至白色检测板（384 孔小体积）中，通过人 IL6 检测试剂盒进行分析。

（标注：assay validation human il6，即 “人 IL6 检测验证示意图 2”）

规格参数

其他规格参数

规格类别	具体内容
应用（Application）	蛋白质定量（Protein Quantification）
品牌（Brand）	HTRF
检测方式（Detection Modality）	HTRF（均相时间分辨荧光）
产品类别（Product Group）	试剂盒（Kit）
样本体积（Sample Volume）	16 µL
运输条件（Shipping Conditions）	干冰运输（Shipped in Dry Ice）
靶标类别（Target Class）	细胞因子（Cytokines）
靶标物种（Target Species）	人类（Human）
技术（Technology）	TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域（Therapeutic Area）	代谢 / 糖尿病（Metabolism/Diabetes）、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化（NASH/Fibrosis）、神经科学（Neuroscience）、肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
单位规格（Unit Size）	10,000 个检测点（10,000 assay points）

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货号：62HIL06PEH

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