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HTRF HUMAN IL8 KIT - 96 PTS 人白介素8测量试剂盒-1X96测试

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品牌： Revvity

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概述

白细胞介素 8（IL8，又称 CXC 趋化因子配体 8，CXCL8）是一种趋化因子，主要由巨噬细胞、T 细胞和中性粒细胞产生。IL8 可作为中性粒细胞的趋化剂，促进中性粒细胞向炎症部位浸润并激活。由于 IL8 能够促进血管生成、细胞增殖，还能抑制细胞凋亡，因此它与多种癌症的发生发展相关。

血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。

检测原理与流程

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加至检测板中，使用 HTRF® 试剂进行检测（检测板为 384 孔小体积白色板或 Revvity 96 孔小体积板，反应体积为 20 微升）。将带有 HTRF 供体和受体标记的抗体预先混合，通过单次加样步骤加入检测体系，以进一步简化检测流程。只需按比例调整各试剂的加样体积，该检测即可适配 1536 孔板的检测规格。

（标注：cytokines-how-it-works-assay-principle-human，即 “人类细胞因子检测原理示意图”）

检测数据分析

酶联免疫吸附试验（ELISA）标准曲线的拟合通常推荐使用四参数逻辑（4PL）曲线。与线性分析相比，这种回归方法能在更宽的浓度范围内对未知样本进行准确测定，因此非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

Revvity 公司还与Myassays.com合作，为您的数据分析提供支持。

检测详情

人 IL8 试剂盒技术规格

技术参数	具体规格
样本量	16 微升
最终检测体积	20 微升
试剂盒组成	冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及说明书
检测限（LOD）与定量限（LOQ）（稀释液中）	6 皮克 / 毫升和 32 皮克 / 毫升
检测范围	32–4000 皮克 / 毫升
出结果时间	室温（RT）下 1 小时
校准方式	英国国家生物标准与控制研究所（NIBSC）（89/520）标准值（国际单位 / 毫升）= 0.01 × HTRF 人 IL8 检测值（皮克 / 毫升）
适用物种	仅人类

分析性能

批内与批间检测

批内检测（n=24，n 为重复检测次数）

样本	IL8 平均值（皮克 / 毫升）	变异系数（CV）
1	58	9%
2	314	4%
3	2074	2%
-	平均变异系数	5%

注：3 个样本各进行 24 次重复检测，并计算每个样本的变异系数（% CV）。

批间检测（n=4，n 为实验批次数量）

样本	IL8 浓度（皮克 / 毫升）	delta R 平均值	变异系数（CV）
1	78	273	2%
2	376	1504	12%
3	1818	5990	5%
-	-	平均变异系数	6.3%

注：每个样本在 4 个不同实验批次中分别检测，并计算每个样本的变异系数（% CV）；“delta R” 为荧光信号差值，是 HTRF 检测技术的关键信号指标。

稀释线性

样本	稀释倍数	IL8 预期值（皮克 / 毫升）	IL8 检测值（皮克 / 毫升）	回收率
1	1	-	2015	-
	4.3	469	489	104%
	7.4	271	292	108%
	10.7	188	210	111%
	-	-	平均值	108%
2	1	-	399	-
	4.3	93	85	91%
	7.4	54	56	103%
	-	-	平均值	97%

注：这些实验中获得的优异回收率表明该检测具有良好的线性。

加标回收率

样本	加入的 IL8（皮克 / 毫升）	IL8 预期值（皮克 / 毫升）	IL8 检测值（皮克 / 毫升）	回收率
1	5000	5179	5008	97%
2	5000	6047	5682	94%

注：向两种不同的血清样本中加入等量重组细胞因子，将标准曲线得到的一组响应值与计算出的预期值进行比较。检测到的回收率接近 100%，验证了本检测所用样本基质（即血清）的适用性。

检测验证

JTE607 抑制 THP1 细胞分泌 IL8

将 THP1 细胞以 10 万个 / 孔的密度接种，用不同浓度的 JTE607 孵育 18 小时，随后用 2 微克 / 毫升脂多糖（LPS）刺激 3 小时。将 16 微升上清液转移至白色检测板（384 孔小体积）中，通过人 IL8 检测试剂盒进行分析。

（标注：assay-validation-human-il8-2，即 “人 IL8 检测验证示意图 2”）

脂多糖（LPS）刺激外周血单个核细胞（PBMC）分泌 IL8

将外周血单个核细胞以 5 万、10 万、20 万和 40 万个 / 孔的密度接种，用不同浓度的脂多糖（0、0.02、0.2、2 微克 / 毫升）刺激 3 小时。将 16 微升上清液转移至白色检测板（384 孔小体积）中，通过人 IL8 检测试剂盒进行分析。

（标注：assay-validation-human-il8，即 “人 IL8 检测验证示意图 1”）

规格参数

其他规格参数

规格类别	具体内容
应用（Application）	蛋白质定量（Protein Quantification）
品牌（Brand）	HTRF
检测方式（Detection Modality）	HTRF（均相时间分辨荧光）
产品类别（Product Group）	试剂盒（Kit）
样本体积（Sample Volume）	16 微升
运输条件（Shipping Conditions）	干冰运输（Shipped in Dry Ice）
靶标类别（Target Class）	细胞因子（Cytokines）
靶标物种（Target Species）	人类（Human）
技术（Technology）	TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域（Therapeutic Area）	肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
单位规格（Unit Size）	96 个检测点（96 assay points）

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货号：62HIL08PET

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1盒/96测试￥6555.34

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