白细胞介素 18(IL18)又称 γ 干扰素诱导因子(IGIF),是一种主要由巨噬细胞分泌的促炎细胞因子。其生物活性与白细胞介素 12(IL12)相近,既能增强自然杀伤细胞(NK 细胞)的活性,又能诱导外周血单核细胞(PBMC)分泌 γ 干扰素(IFNγ)。IL18 的一个重要作用是清除眼部的血管内皮生长因子(VEGF),从而保护视网膜。在年龄相关性黄斑变性(AMD)的治疗中,IL18 常与抗 VEGF 抗体联合使用。除上述生理作用外,IL18 的调控异常还会引发严重的炎症反应。
血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测技术的灵敏度足以实现对血清或血浆中低浓度分析物的检测。
将细胞上清液、样本或标准品直接加至检测板中,使用 HTRF® 试剂进行检测(检测板为 384 孔小体积白色板或 Revvity 96 孔小体积板,反应终体积为 20 微升)。标记有 HTRF 供体和受体的抗体已预先混合,通过单次加样即可完成操作,进一步简化了检测流程。只需按比例调整各试剂的加样体积,该检测即可适配最高 1536 孔板的检测格式。
(附图标注:1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg,即 “人 IL13 检测原理示意图”)
酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线拟合通常推荐使用四参数逻辑(4PL)曲线。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,因此非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。如需全面了解如何处理 HTRF 数据以及四参数逻辑 1/y² 拟合(4PL 1/y² fitting)的方法,请访问此页面。Revvity 还与Myassays.com合作,为您的数据分析提供支持。您可以访问一款免费在线软件,用于进行 IL18 检测数据分析。
对 3 个样本分别进行 24 次重复检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。
对每个样本在 4 次独立实验(不同日期)中进行检测,并计算每个样本的变异系数(% CV)。