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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Cytokines > HTRF HUMAN IL31 KIT - 10K PTS

概述


白细胞介素 - 31(IL-31)主要由辅助性 T 细胞 2(Th2 细胞)产生,可作用于活化的单核细胞和未受刺激的上皮细胞,可能参与皮肤炎症过程,尤其与瘙痒(pruritus)症状相关。
血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,扩增发光均相免疫分析(AlphaLISA)检测法的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。检测时,需始终遵循推荐的实验方案,并避免使用严重溶血的样本。


工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,使用均相时间分辨荧光(HTRF®)试剂进行检测(检测板可选用 384 孔小体积白色板或瑞孚迪(Revvity)96 孔小体积板,反应体积为 20 微升)。偶联 HTRF 供体荧光团与受体荧光团的抗体已预先混合,可通过单次加样步骤加入,进一步简化检测流程。该检测可轻松调整至 1536 孔板检测格式,只需按比例调整各试剂的添加体积即可。
(标注:1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg,即 “人源白细胞介素 - 31 检测原理示意图”)

检测数据分析

四参数逻辑斯蒂(4PL)曲线是拟合酶联免疫吸附试验(ELISA)标准曲线的常用方法。与线性分析相比,这种回归方法能在更宽的浓度范围内对未知样本进行准确定量,非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。
如需充分了解如何处理 HTRF 数据以及四参数逻辑斯蒂 1/y² 拟合方法,可参考相关资料。瑞孚迪(Revvity)还与Myassays.com合作,为数据分析提供支持,您可访问一款免费在线软件,用于进行 IL-31 检测数据分析。


检测详情

人源 IL-31 试剂盒技术规格

  • 样本量:16 微升
  • 最终检测体积:20 微升
  • 试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及实验方案
  • 检测限(LOD)与定量限(LOQ)(稀释液中):18 皮克 / 毫升、87 皮克 / 毫升
  • 检测范围:87–20000 皮克 / 毫升
  • 出结果时间:室温下孵育过夜
  • 适用物种:仅人


分析性能

板内与板间重复性

板内重复性(n=24)

对 3 个样本分别进行 24 次检测,并计算变异系数(CV):
  • 样本 1:IL-31 平均值为 199 皮克 / 毫升,变异系数 7%
  • 样本 2:IL-31 平均值为 9888 皮克 / 毫升,变异系数 6%
  • 样本 3:IL-31 平均值为 20883 皮克 / 毫升,变异系数 5%
  • 平均变异系数:6%
(注:每个样本均检测 24 次,并计算每个样本的变异系数)

板间重复性(n=4)

对 3 个样本分别在 4 次独立实验中检测,并计算变异系数(CV):
  • 样本 1:IL-31 浓度为 388 皮克 / 毫升,差值平均值(delta R)为 487,变异系数 19%
  • 样本 2:IL-31 浓度为 1878 皮克 / 毫升,差值平均值(delta R)为 1674,变异系数 11%
  • 样本 3:IL-31 浓度为 9091 皮克 / 毫升,差值平均值(delta R)为 4007,变异系数 4%
  • 平均变异系数:11%
(注:每个样本均在 4 次独立实验中检测,并计算每个样本的变异系数;delta R 为 HTRF 检测中的信号差值指标)


规格参数


  • 应用领域:蛋白质定量
  • 品牌:HTRF(均相时间分辨荧光技术)
  • 检测方式:HTRF(均相时间分辨荧光)
  • 产品类别:试剂盒
  • 样本体积:16 微升
  • 运输条件:干冰运输
  • 靶点类别:细胞因子
  • 靶点物种:人
  • 技术平台:TR-FRET(时间分辨荧光共振能量转移)
  • 治疗领域:肿瘤学与炎症
  • 单位规格:10000 个检测点


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