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HTRF HUMAN TNF ALPHA KIT - 96 PTS 人的肿瘤坏死因子alpha测量试剂盒-1x96测试

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概述

肿瘤坏死因子 α（TNF alpha）是一种主要由巨噬细胞、T 细胞和中性粒细胞产生的细胞因子。肿瘤坏死因子 α 可作为中性粒细胞的趋化剂，促进中性粒细胞向炎症部位浸润并激活。此外，肿瘤坏死因子 α 还与多种癌症相关，它能促进血管生成和细胞增殖，同时抑制细胞凋亡。

血清样本检测通常需要更高的灵敏度。在某些情况下，AlphaLISA 检测的灵敏度足以检测出血清或血浆中低水平的分析物。检测时，需始终遵循推荐方案，并避免使用严重溶血的样本。

作用原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中，使用 HTRF 试剂进行检测（检测板可选用 384 孔小体积白色板或 Revvity 96 孔小体积板，反应体积为 20 微升）。偶联 HTRF 供体荧光团和受体荧光团的抗体已预先混合，可通过单次加样步骤加入，进一步简化检测流程。该检测可轻松调整至 1536 孔板格式，只需按比例调整各试剂的添加体积即可。

（标注：1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg，即 “人肿瘤坏死因子 α 检测原理示意图”）

检测数据分析

四参数逻辑斯蒂（4PL）曲线是拟合 ELISA 标准曲线的常用方法。与线性分析相比，这种回归方法能在更宽的浓度范围内对未知样本进行准确定量，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

为帮助用户充分掌握 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合方法，Revvity 与Myassays.com合作提供支持。用户可访问免费的在线软件进行肿瘤坏死因子 α 检测数据分析。

检测详情

人肿瘤坏死因子 α 试剂盒技术规格

样本量：16 微升
最终检测体积：20 微升
试剂盒组成：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及检测方案
检测限与定量限（稀释液中）：5 皮克 / 毫升、29 皮克 / 毫升
检测范围：29-2500 皮克 / 毫升
出结果时间：室温下 2 小时
校准：NIBSC（12/154）单位值（国际单位 / 毫升）= 0.1×HTRF 人肿瘤坏死因子 α 检测值（皮克 / 毫升）
适用物种：仅人

分析性能

板内与板间重复性

板内重复性（n=24）

对 3 个样本分别进行 24 次检测并计算变异系数（CV）：样本 1 的肿瘤坏死因子 α 平均值为 113 皮克 / 毫升，变异系数 6%；样本 2 的平均值为 344 皮克 / 毫升，变异系数 3%；样本 3 的平均值为 1399 皮克 / 毫升，变异系数 6%；3 个样本的平均变异系数为 5%。

板间重复性（n=4）

对 3 个样本分别在 4 次独立实验中检测并计算变异系数（CV）：样本 1 的肿瘤坏死因子 α 值为 78 皮克 / 毫升，差值平均值（delta R）为 272，变异系数 11%；样本 2 的肿瘤坏死因子 α 值为 312 皮克 / 毫升，差值平均值为 911，变异系数 7%；样本 3 的肿瘤坏死因子 α 值为 1250 皮克 / 毫升，差值平均值为 2894，变异系数 6%；3 个样本的平均变异系数为 6%。

稀释线性

实验中获得的优异回收率表明该检测具有良好的线性。其中，样本 1 未稀释时检测值为 2336 皮克 / 毫升，稀释 3 倍后预期值 782 皮克 / 毫升、检测值 898 皮克 / 毫升、回收率 115%；稀释 4.3 倍后预期值 543 皮克 / 毫升、检测值 567 皮克 / 毫升、回收率 104%；稀释 10.7 倍后预期值 218 皮克 / 毫升、检测值 252 皮克 / 毫升、回收率 116%，平均回收率 112%。样本 2 未稀释时检测值为 449 皮克 / 毫升，稀释 3 倍后预期值 150 皮克 / 毫升、检测值 179 皮克 / 毫升、回收率 119%，平均回收率 119%。

加标回收率

对 2 个样本进行加标回收实验：样本 1 加入 1250 皮克 / 毫升肿瘤坏死因子 α，预期值 1555 皮克 / 毫升，检测值 1523 皮克 / 毫升，回收率 98%；样本 2 加入 1250 皮克 / 毫升肿瘤坏死因子 α，预期值 1874 皮克 / 毫升，检测值 1892 皮克 / 毫升，回收率 101%。

检测验证

JTE607 抑制 THP1 细胞分泌肿瘤坏死因子 α

将 THP1 细胞以每孔 10 万个细胞的密度接种，加入不同浓度的 JTE607 孵育 18 小时，随后用 2 微克 / 毫升的脂多糖（LPS）刺激 3 小时。将 16 微升上清液转移至白色检测板（384 孔小体积）中，使用人肿瘤坏死因子 α 检测试剂盒进行分析。

（标注：1assay-validation-human-tnf-alpha-2.svg，即 “JTE607 抑制 THP1 细胞分泌肿瘤坏死因子 α 检测结果图”）

脂多糖刺激外周血单个核细胞（PBMCs）分泌肿瘤坏死因子 α

将外周血单个核细胞分别以每孔 5 万、10 万、20 万和 40 万个细胞的密度接种，用不同浓度的脂多糖（0、0.02、0.2、2 微克 / 毫升）刺激 3 小时。将 16 微升上清液转移至白色检测板（384 孔小体积）中，使用人肿瘤坏死因子 α 检测试剂盒进行分析。

（标注：2assay-validation-human-tnf-alpha-3.svg，即 “脂多糖刺激外周血单个核细胞分泌肿瘤坏死因子 α 检测结果图”）

规格参数

应用领域：蛋白质定量
品牌：HTRF
检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
产品类别：试剂盒
样本体积：16 微升
运输条件：干冰运输
靶点类别：细胞因子
靶点物种：人
技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
治疗领域：代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、肿瘤学与炎症
单位规格：96 个检测点

没有数据

货号：62HTNFAPET

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1盒/96测试￥6555.34

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