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HTRF MOUSE IFN BETA KIT - 10K PTS 小鼠干扰素β蛋白检测试剂盒-10,000 测试

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品牌： Revvity

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概述

I 型干扰素（包括 α 干扰素 IFN-α 和 β 干扰素 IFN-β）在机体对抗病毒感染的固有免疫应答中发挥关键作用。IFN-β 主要由成纤维细胞、巨噬细胞、树突状细胞及内皮细胞产生，其基因表达受模式识别受体（如 Toll 样受体）下游转录因子调控，包括 IRF-3、c-Jun/ATF-2 和 NF-κB。其中，IFN-β 是 cGas-cGAMP-STING 通路激活的主要功能性检测指标。IFN-β 分泌后会结合并激活 IFNAR1/IFNAR2 受体复合物，该过程依赖 STAT1/2 转录因子；磷酸化的 STAT1/2 会进一步诱导抗病毒基因表达。

工作原理

检测原理

将细胞上清液、样本或标准品直接加至检测板（使用 384 孔低体积白板或 Revvity 低体积 96 孔板，反应体积 20 微升），再通过单步加样加入预混合的 HTRF 供体和受体标记抗体，进一步简化检测流程。该检测可扩展至 1536 孔板格式，只需按比例调整各试剂的添加体积即可。

（配图说明：1cytokines-how-it-works-assay-principle-human-il13-62hil13peg-62hil13peh.svg）

检测数据分析

通常推荐使用四参数逻辑斯蒂（4PL）曲线拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比，这种回归方法能在更宽的浓度范围内准确测定未知样本，非常适合细胞因子释放等生物系统的分析。

为帮助使用者掌握 HTRF 数据处理及 4PL 1/y² 拟合方法，Revvity 与Myassays.com合作提供支持，使用者可通过免费在线软件进行 IFN-β 检测数据分析。

检测详情

小鼠 IFN-β 试剂盒技术规格

样本用量：16 微升（µL）
最终检测体积：20 微升（µL）
试剂盒组成：冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液及操作说明书
检测限（LOD）与定量限（LOQ）（在稀释液中）：4 皮克 / 毫升（pg/mL）、17 皮克 / 毫升（pg/mL）
检测范围：17–2000 皮克 / 毫升（pg/mL）
出结果时间：室温（RT）孵育过夜
适用物种：仅小鼠（Mouse only）

分析性能

批内与批间精密度

批内精密度（n=24）：样本 1 的 IFN-β 平均浓度为 75pg/mL，变异系数（CV）10%；样本 2 平均浓度 200pg/mL，CV 3%；样本 3 平均浓度 1125pg/mL，CV 3%；所有样本平均 CV 为 5.3%。
批间精密度（n=6）：样本 1 的 IFN-β 平均浓度为 58pg/mL，CV 3.6%；样本 2 平均浓度 348pg/mL，CV 3.3%；样本 3 平均浓度 1092pg/mL，CV 7.3%；所有样本平均 CV 为 4.7%。

检测验证

小鼠 STING 特异性激动剂 CMA 和 DMXAA 诱导 NIH-3T3 成纤维细胞释放 IFN-β

将小鼠 NIH-3T3 成纤维细胞系接种于 96 孔培养板（每孔 100,000 个细胞），孵育 6 小时。随后用 200µM 的小鼠 STING 特异性合成激动剂 CMA 和 DMXAA 处理细胞（体系 100 微升），孵育 24 小时后收集细胞上清液，按 HTRF 试剂盒说明书步骤测定分泌的 IFN-β 水平。

（配图说明：1assay-validation-mouse-ifn-beta-1.svg）

多种 STING 激动剂处理小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞系后的 IFN-β 分泌

将小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞系接种于 96 孔培养板（每孔 100,000 个细胞），孵育过夜。随后用固定浓度的 STING 合成激动剂（CMA、DMXAA、ADUS100）及内源性 STING 激动剂 2'3'-cGAMP 处理细胞（体系 100 微升），分泌 24 小时后收集细胞上清液，按 HTRF 试剂盒说明书步骤测定释放的 IFN-β 水平。

（配图说明：2assay-validation-mouse-ifn-beta-2.svg）

内源性 STING 激动剂 2'3'-cGAMP 和合成小分子 ADUS100 诱导小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞系剂量依赖性分泌 IFN-β

将小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞系接种于 96 孔培养板（每孔 100,000 个细胞），孵育 5 小时。随后用不同浓度的内源性 STING 激动剂 2'3'-cGAMP 或合成小分子 ADUS100 处理细胞（体系 100 微升），分泌过夜后收集细胞上清液，按 HTRF 试剂盒说明书步骤测定释放的 IFN-β 水平。

（配图说明：3assay-validation-mouse-ifn-beta-3.svg）

规格参数

其他规格：无相关详细信息（原文未提供具体内容）
应用领域：蛋白质定量
品牌：HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移技术，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence 缩写，为该类检测常用技术品牌标识）
检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光共振能量转移技术）
产品类别：试剂盒（Kit）
样本体积：16 微升（µL）
运输条件：干冰运输（Shipped in Dry Ice）
目标类别：细胞因子（Cytokines）
目标物种：小鼠（Mouse）
技术类型：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移技术，Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer 缩写）
治疗领域：肿瘤学与炎症（Oncology & Inflammation）
单位规格：10,000 次检测用量（10,000 assay points）

没有数据

货号：62MIFNBPEH

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参考价格 ¥ 154960.03

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