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HTRF MAB ANTI H3K4 ME3-EU - 10K PTS

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品牌： Revvity

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概述

Revvity 提供一系列即用型 HTRF 工具箱试剂，用于构建组蛋白 H3 甲基转移酶（HMT）和去甲基化酶（HDM）活性检测。这种单克隆抗体 Eu-cryptate 偶联物对组蛋白 H3K9Me1 甲基化标记具有特异性。它可用于开发具有最高特异性和灵敏度的生化测定，用于 HMT 和 HDM 的筛选和研究。

规格

其他规格

检测点	500
检测靶标类型	荧光试剂
检测技术	HTRF
品牌	HTRF
数量	1
治疗领域	新陈代谢/糖尿病神经肿瘤学和炎症
单位面积	500 个检测点

运作方式

检测原理

Revvity 基于 HTRF 的试剂使研究人员能够灵活地为 HMT、DMT 或 HDAC 等酶创建高度特异性的定制组蛋白修饰检测。所有这些检测都使用生物素化组蛋白 H3 肽底物、Eu-cryptate 标记检测抗体和 XL665 偶联的链霉亲和素。检测特异性来自所选的 Eu-cryptate 标记的抗组蛋白抗体与生物素化肽底物的组合。HTRF 信号与甲基特异性肽（例如未甲基化、单甲基化、二甲基化或三甲基化肽）的浓度成正比。

HTRF Anti histone H3K9 Me1-EuK mAb conjugate 1.svg

检测方案

两步法分析在单个孔中进行，无需洗涤步骤，可轻松小型化为 384 孔规格。含有生物素化肽、酶、辅因子和化合物的酶促反应之后是添加 Eu 标记的抗甲基化组蛋白 H3 抗体和 SA-XL665 的检测步骤。HTRF 信号在短暂的室温孵育后被检测到，并且在多次读数中保持稳定。

HTRF Anti histone H3K9 Me1-EuK mAb conjugate 2.svg

检测详情

抗组蛋白 H3 Eu-cryptate 偶联物

甲基化水平	K4	K9 系列	K27 餐厅	K36 系列
我0	V	V
我1	V	V	V	V
Me2 系列	V	V	V	V
Me2 系列	V		V

抗体特异性

每种 Eu-cryptate 标记的抗组蛋白抗体可识别单个组蛋白 H3 赖氨酸残基和甲基化水平。Revvity 对每种抗体的替代肽和甲基化水平进行了交叉反应性研究，以确保特异性。

肽单克隆抗体	H3K4 系列	H3K9 系列	H3K27	H3K36
	我0	我1	我 2	我 3	我0	我1	我 2	我1	我 2	我 3	我1	我 2
H3（1-21）	100%	1.3%	0%	0%	100%	0.7%	0%	-	-	0%	-	-
H3（21-44）	0%	-	-	0%	-	-	0%	0%	0%	0%	4.4%	0%
H3（1-21） K4Ac	0%	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-	-
H3（1-21） K9Ac	-	-	-	-	0.1%	-	-	-	-	-	-	-
H3（1-21） K4me1	0%	100%	0.6%	0.5%	-	-	0%	-	-	0%	-	-
H3（1-21） K4me2	0%	15%	100%	7.4%	-	-	0%	-	-	0%	-	-
H3（1-21） K4me3	0%	0.4%	0%	100%	-	-	0%	-	-	0%	-	-
H3（1-21） K9me1	-	-	-	0%	0.4%	100%	0.1%	-	-	0%	-	-
H3（1-21） K9me2	-	-	-	0%	0.3%	0%	100%	-	-	0%	-	-
H3（1-21） K9me3	-	-	-	0.2%	0.1%	0%	0.1%	-	-	0.2%	-	-
H3(21-44) K27me1	-	-	-	0%	-	-	0.1%	100%	1.5%	0.2%	-	0%
H3（21-44） K27me2	-	-	-	0.2%	-	-	0%	1.4%	100%	3.3%	-	0.1%
H3（21-44） K27me3	-	-	-	0%	-	-	0.1%	0%	0%	100%	-	0%
H3（21-44） K36me1	-	-	-	0%	-	-	0.1%	-	-	0%	100%	0.7%
H3（21-44） K36me2	-	-	-	0%	-	-	0.1%	-	-	0.1%	0.60%	100%
H3(21-44) K36me3	-	-	-	0.1%	-	-	0.1%	-	-	0.4%	0%	0%

检测验证

酶法检测的验证

Revvity 已经使用抗体偶联物表观遗传学检测组合开发了许多用于 HMT/HDM/HDAC 酶的 HTRF 检测。下表总结了针对 H3K9 位置的分析设置，并在每种情况下提供了包括材料和方法以及获得的结果的技术说明。

酶	类型	甲基化水平	生物素化底物	Eu3+-加密 MAb
JMJD1A 型	去甲基化酶	K9 me2 →me0	H3（1-21）K9me2	H3K9me0
G9a	甲基转移酶	K9 me0 →me2	H3（1-21）K9me0	H3K9me2
G9a	甲基转移酶	K9 me1 →me2	H3（1-21）K9me1	H3K9me2
JMJD2C	去甲基化酶	K9 me3 →me2	H3（1-21）K9me3	H3K9me2
HDAC1	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
HDAC2	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
HDAC3 系列	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
HDAC6 系列	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
HDAC8 系列	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
SIRT1	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
SIRT2	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
SIRT3	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0
SIRT6	脱乙酰酶	交流→未修改	H3（1-21）K9Ac	H3K9me0

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