概述

作用原理

检测原理

检测流程

1. 首先将 SIRT1 酶与标记有 d2 的乙酰化底物共同孵育（孵育体系中可加入或不加入待检测化合物）；
2. 加入烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD⁺）以启动反应；
3. 随后加入标记有铕穴状化合物的单克隆抗体；
4. 检测缓冲液中含有乙二胺四乙酸（EDTA）和 SIRT 抑制剂（烟酰胺），用于终止酶促反应。

分析性能

筛选稳健性

• 0 毫单位（mU）酶：无去乙酰化反应；
• 100 毫单位（mU）酶：100% 去乙酰化反应；
• 10 毫单位（mU）酶：对应半数有效浓度（EC50）；
• 20 毫单位（mU）酶：对应 80% 有效浓度（EC80）。

激活剂与抑制剂化合物的筛选

• 两种多酚类化合物：白藜芦醇（resveratrol）、白皮杉醇（piceatannol）；
• 两种非多酚类化合物：激活剂 1（activator1）、激活剂 2（activator2）；
• 一种参照抑制剂：烟酰胺（nicotinamide，SIRT 抑制剂的标准参照物质）。

规格参数

核心规格信息

• 应用领域：生化酶促检测（针对 SIRT1 酶活性的体外生化检测）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光技术，无需洗涤步骤的均相检测）
• 产品类别：试剂盒
• 样本体积：10 微升（µL）
• 运输条件：干冰运输（确保试剂活性稳定）
• 靶点类别：表观遗传学相关（针对表观遗传调控中的去乙酰化酶 SIRT1）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移技术，降低背景荧光干扰）
• 治疗领域：代谢 / 糖尿病、神经科学、肿瘤学与炎症（对应 SIRT1 调节剂的潜在治疗方向）
• 单位规格：20,000 个检测点（可完成 20,000 次独立检测反应）