品牌: Revvity
概述
HTRF KinEASE试剂盒系列提供了一种简单的生化方法,用于研究激酶活性、筛选抑制剂并对其进行表征。其中3种丝氨酸/苏氨酸激酶(STK)试剂盒和1种酪氨酸激酶(TK)试剂盒,分别为评估丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸残基的磷酸化提供了半通用方法。HTRF KinEASE STK S3试剂盒已在43种丝氨酸/苏氨酸激酶上得到验证。本页面的检测验证部分列出了这些激酶,并提供了实验设置的技术提示。该试剂盒系列还包括一款探索试剂盒,当研究未经验证的酶时,可帮助确定3种STK试剂盒中哪一种适用。工作原理
检测原理 每个HTRF KinEASE试剂盒都基于相同的检测格式,使用通用的生物素化底物、磷酸化特异性铕穴状化合物标记单克隆抗体和链霉亲和素-XL665(SA-XL665)。所有3种STK肽底物都包含相同的抗体检测序列,紧邻一个被酶识别的可变序列。磷酸化的靶残基位于两者之间,既是酶活性(未磷酸化时)的一部分,也是抗体检测(磷酸化时)的一部分。研究表明,3种不同的可变序列可用于研究大多数丝氨酸/苏氨酸激酶。 检测方案 如下所示,所有HTRF KinEASE检测的工作原理相同,包括两个步骤: - 步骤1:激酶反应 在存在或不存在化合物以及适当底物的情况下孵育激酶。仅在酪氨酸激酶缓冲液中添加补充的酶缓冲液。加入ATP启动反应。 - 步骤2:检测 加入铕穴状化合物和XL665偶联物。检测缓冲液中含有EDTA,用于终止酶促反应。 检测验证 目前,该平台已在以下激酶上得到验证: **KinEASE STK S3** AKT1、AKT2、AKT3、ARK5、ASK1、极光激酶C(Aurora C)、BrSK1、CDC42 BPA、CDC42 BPB、CHUK、CLK3、COT、DMPK、DYRK2、EEF-2K、GRK5、GSK3 α、HIPK2、HIPK3、IKBKB、IKK α、IKK β、LOK、MAP3K8、MINK1、MRCK α、MRCK β、MSK1、MSK2、MSSK1、MST1、MST2、NEK2、NEK3、NEK6、NEK7、NLK、p70S6K、PIM1、PIM2、PKAC g、PKB α、PKB g、PKB β、PLK3、PRKACG、RPS6KA4、RPS6KA5、RPS6KB1、SAD1、SGK1、SGK2、SGK3、SGKL、Snk、STK23、STK3、STK4、WNK2、WNK3规格
其他规格 - 应用:生化酶检测 - 品牌:HTRF - 检测方式:HTRF - 产品类别:试剂盒 - 样本体积:10 µL - 运输条件:常温运输 - 靶标类别:激酶 - 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET) - 治疗领域:代谢/糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎/肝纤维化、肿瘤学与炎症 - 单位规格:100,000次检测