品牌: Revvity
HTRF KinEASE 试剂盒系列提供了一种简单的生化方法来研究激酶活性、筛选抑制剂并对其进行表征。3 个 STK 试剂盒和 1 个 TK 试剂盒提供了一种半通用方法,分别用于评估丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸残基的磷酸化。HTRF KinEASE STK S2 检测已在 18 种丝氨酸/苏氨酸激酶上得到验证。本页的检测验证部分列出了它们,并提供了设置的技术提示。该试剂盒系列还包括一个 Discovery 试剂盒,以帮助确定在使用未经验证的酶时,三种 STK 试剂盒中的哪一种是合适的。
检测靶标类型 | 工具箱 |
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品牌 | HTRF |
治疗领域 | 新陈代谢/糖尿病 NASH/纤维化 肿瘤学和炎症 |
单位面积 | 100,000 个检测点 |
每个 HTRF KinEASE 试剂盒都基于相同的检测形式,并使用通用生物素化底物、磷酸化特异性 Eu-cryptate 标记的单克隆抗体和 SA-XL665。所有三种 STK 肽底物均由相同的抗体检测序列组成,旁边是酶识别的可变序列。磷酸化的靶标残基介于两者之间,是酶活性(未磷酸化)和抗体检测(磷酸化)序列的一部分。已经表明,3 个不同的可变序列可以使大多数丝氨酸/苏氨酸激酶的研究成为可能。
如图所示,所有 HTRF KinEASE 检测都以相同的方式工作,涉及两个步骤:
第 1 步:激酶反应 激酶在存在或不存在化合物和适当底物的情况下孵育。补充的酶缓冲液仅添加到 tyr 激酶的激酶缓冲液中。添加 ATP 以启动反应。
第 2 步:检测 Eu-cryptate 和 XL665 偶联物。检测缓冲液含有 EDTA 以终止酶促反应。