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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF (H) ADAR1 TOTAL KIT - 500 PTS HTRF人源核糖核酸特异性腺苷脱氨酶1检测试剂盒,500测试

概述
ADAR1 是由 ADAR 基因编码的两种酶之一。它与双链 RNA(dsRNA)结合,并将其中的腺苷脱氨基转化为肌苷(次黄嘌呤)。ADAR 蛋白在转录后发挥作用,改变 RNA 的核苷酸组成。它们所进行的脱氨基作用会干扰常见的 A:U 配对,并使 RNA 结构不稳定。


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在经 siRNA 处理的 HepG2 细胞中对总 ADAR1 检测方法的验证
将 HepG2 细胞以不同的细胞密度接种于 96 孔板中,每孔加入 80 微升完全培养基,然后在 37°C、5% 二氧化碳的条件下孵育过夜。培养后,通过加入 20 微升 Lipofectamine® RNAiMax/siRNA(针对 ADAR1)混合物对细胞进行 siRNA 处理,然后在 37°C、5% 二氧化碳的条件下孵育 24 小时和 48 小时。对于未处理的细胞,则加入 20 微升 OptMEM 培养基代替 siRNA 混合物。孵育后,使用 50 微升补充的 1X 裂解缓冲液 #1 在室温下轻轻摇晃裂解细胞 30 分钟,然后将 16 微升裂解液转移至低体积白色微孔板中,随后加入 2 微升 HTRF d2 检测试剂和 2 微升 HTRF Eu-K 检测试剂。在孵育过夜后记录 HTRF 信号。

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