<div class="auto-hide-last-sibling-br paragraph-qzbcQC paragraph-element br-paragraph-space" style="-webkit-font-smoothing: antialiased; box-sizing: border-box; -webkit-tap-highlight-color: rgba(0, 0, 0, 0); line-height: var(--md-box-samantha-normal-text-line-height); overflow-anchor: auto; font-family: Inter, -apple-system, BlinkMacSystemFont, " segoe="" ui",="" "sf="" pro="" sc",="" display",="" icons",="" "pingfang="" "hiragino="" sans="" gb",="" "microsoft="" yahei",="" "helvetica="" neue",="" helvetica,="" arial,="" sans-serif;="" text-wrap-mode:="" wrap;="" background-color:="" rgb(255,="" 255,="" 255);="" color:="" var(--md-box-samantha-normal-text-color)="" !important;"="">检测方法验证
在经 siRNA 处理的 HepG2 细胞中对总 ADAR1 检测方法的验证
将 HepG2 细胞以不同的细胞密度接种于 96 孔板中,每孔加入 80 微升完全培养基,然后在 37°C、5% 二氧化碳的条件下孵育过夜。培养后,通过加入 20 微升 Lipofectamine® RNAiMax/siRNA(针对 ADAR1)混合物对细胞进行 siRNA 处理,然后在 37°C、5% 二氧化碳的条件下孵育 24 小时和 48 小时。对于未处理的细胞,则加入 20 微升 OptMEM 培养基代替 siRNA 混合物。孵育后,使用 50 微升补充的 1X 裂解缓冲液 #1 在室温下轻轻摇晃裂解细胞 30 分钟,然后将 16 微升裂解液转移至低体积白色微孔板中,随后加入 2 微升 HTRF d2 检测试剂和 2 微升 HTRF Eu-K 检测试剂。在孵育过夜后记录 HTRF 信号。
