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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF SLP-76 P-S376 (M) KIT - 50K PTS

概述


这种基于 HTRF 细胞的检测方法能够快速、定量地检测丝氨酸 376 磷酸化的小鼠 SLP-76。磷酸化的 SLP-76 会形成一个支架,关键的信号复合物在此基础上构建,同时它也是 T 淋巴细胞活化的一个标志物。

工作原理


小鼠磷酸化 SLP-76(Ser376)检测原理
小鼠磷酸化 SLP-76(Ser376)检测用于测量在丝氨酸 376 位发生磷酸化的小鼠 SLP-76。与蛋白质印迹法不同,该检测完全基于微孔板进行,无需凝胶、电泳或转膜步骤。此检测使用两种标记抗体:一种偶联有供体荧光团,另一种偶联有受体荧光团。第一种抗体经筛选,能特异性结合蛋白质上的磷酸化基序;第二种抗体则能不依赖蛋白质的磷酸化状态对其进行识别。蛋白质磷酸化会促使形成一种免疫复合物,该复合物包含两种标记抗体,这会使供体荧光团与受体荧光团接近,从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比,并且该检测采用无洗涤格式,为评估蛋白质的磷酸化状态提供了一种途径。

磷酸化检测原理(STING 磷酸化)

小鼠磷酸化 SLP-76(Ser376)双板检测方案
双板方案的流程为:先在 96 孔板中培养细胞,然后进行裂解,接着将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中,之后再加入小鼠磷酸化 SLP-76(Ser376)HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

生物标志物检测方案原理(α- 微管蛋白)

小鼠磷酸化 SLP-76(Ser376)单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测小鼠磷酸化 SLP-76(Ser376)可在单个板中完成,该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选设计的方案能够实现小型化,同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

磷酸化检测单板方案原理(总 BTK)

简化通路
SLP-76 的功能与调控
T 细胞受体(TCR)结合后,会促使淋巴细胞蛋白酪氨酸激酶(Lck)对 TCR/CD3 复合物胞质侧的免疫受体酪氨酸活化基序(ITAMs)进行磷酸化。Zap-70 被招募到 TCR/CD3 复合物上,并在此发生磷酸化而活化。ZAP-70 使 SLP-76 磷酸化。活化的 SLP-76 转移到质膜上,促进多蛋白复合物的形成,该复合物参与 T 淋巴细胞的活化、存活和增殖过程。

SLP-76 简化通路图

规格参数


其他规格
应用领域:细胞信号传导
品牌:HTRF
检测方式:HTRF
分子修饰:磷酸化
产品类别:试剂盒
样品体积:16 微升
运输条件:干冰运输
目标类别:磷酸化蛋白
目标物种:小鼠
技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
治疗领域:肿瘤学与炎症
单位规格:50,000 个检测点


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货号:63ADK109PEY
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