基于我们均一且稳定的 HTRF 技术,磷酸化 JNK 检测试剂盒旨在直接在完整细胞中检测和研究在 Thr183 和 Tyr185 位点发生磷酸化的活化 JNK。该试剂盒采用简化的混合读数、无需洗涤的方案,可用于从基础研究
使用 HTRF 试剂检测磷酸化 JNK(Thr183/Tyr185)可在同一板中完成,该板可用于细胞培养、刺激和裂解,无需洗涤步骤。这种为高通量筛选(HTS)设计的方案可实现微型化,同时保持稳定的 HTRF 检测质量。
培养 HEK293 细胞 2 天,用 500nM 茴香霉素刺激 30 分钟。细胞裂解后,离心 10 分钟收集可溶性上清液。使用等量的裂解物进行蛋白质印迹法(WB)与 HTRF 的平行比较。100,000 个细胞相当于 16μg 总蛋白。HTRF 磷酸化 JNK 检测与蛋白质印迹法的灵敏度相当:两种技术都需要 3,125 个细胞。
小鼠 NIH-3T3 细胞(100,000 个细胞 / 孔)在 37°C 下用不同浓度的茴香霉素刺激 30 分钟。裂解孵育 30 分钟后,使用磷酸化 JNK 检测的双板检测方案测量磷酸化 JNK。
悬浮的 Jurkat 细胞(80,000 个细胞 / 孔)在 37°C 下与不同浓度的 IL-1Ra(IL-1 受体拮抗剂)孵育 10 分钟。然后加入 10nM IL-1β(激动剂)并孵育 10 分钟。裂解孵育 30 分钟后,使用磷酸化 JNK 检测测量 JNK 磷酸化的抑制情况。该检测采用单板检测方案。
简化通路
c-Jun 氨基末端激酶(JNKs),也称为应激活化蛋白激酶(SAPKs),是丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族的成员。JNKs 可被多种环境应激、炎性细胞因子激活,在某些情况下还可被生长因子和 G 蛋白偶联受体激动剂激活。活化的 JNK 转移到细胞核中,可磷酸化多种转录因子,如 c-Jun、ATF-2 和 p53。JNK 通路调控多种细胞反应,包括增殖、存活与凋亡、神经发育、炎症、代谢和 DNA 修复。
- 应用:细胞信号传导
- 品牌:HTRF
- 检测方式:HTRF
- 分子修饰:磷酸化
- 产品类别:试剂盒
- 样品体积:16μL
- 运输条件:干冰运输
- 靶标类别:磷酸化蛋白
- 靶标物种:人、小鼠
- 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
- 治疗领域:心血管疾病、传染病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)/ 纤维化、神经科学、肿瘤学与炎症
- 单位规格:50,000 个检测点