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HTRF (H) MEK1 P-S298 KIT - 500 PTS

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品牌： Revvity

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概述

磷酸化 MEK1（Ser298）试剂盒可检测 Ser298 位点磷酸化的内源性 MEK1 蛋白，为研究 MAPK/ERK 通路中的 RAS-RAF-MEK 级联反应提供支持。MEK1 是一种双特异性丝裂原活化蛋白激酶，由 RAF 磷酸化激活，负责对 ERK 进行磷酸化修饰。ERK 是细胞增殖、存活和分化通路中最重要的信号节点及蛋白激酶之一。

工作原理

磷酸化 MEK1（Ser298）检测原理

磷酸化 MEK1（Ser298）检测用于测定 Ser298 位点磷酸化的 MEK1。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测为全板基检测，无需凝胶、电泳或转膜步骤。检测采用两种抗体：一种标记供体荧光团，另一种标记受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白上的磷酸化基序，第二种抗体则能识别该蛋白且不受其磷酸化状态影响。当蛋白质发生磷酸化时，两种标记抗体形成免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白的浓度直接成正比，且可在无需洗涤的检测形式下评估蛋白质的磷酸化状态。

Phospho how it works phospho mek1 ser298 cellular assay principle

磷酸化 MEK1（Ser298）双板检测方案

双板方案流程为：先在 96 孔板中培养细胞，裂解后将裂解物转移至 384 孔低体积检测板，再加入磷酸化 MEK1（Ser298）HTRF 检测试剂。该方案可监测细胞的活力和汇合度。

Phospho how it works phospho mek1 ser298 2 plate assay protocol

磷酸化 MEK1（Ser298）单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测磷酸化 MEK1（Ser298）时，可在单个用于培养、刺激和裂解的培养板中完成所有操作，无需洗涤步骤。这种专为高通量筛选（HTS）设计的方案支持实验微型化，同时保持稳定可靠的 HTRF 检测质量。

Phospho how it works total mek 1 plate assay protocol

检测验证

HeLa 细胞中磷酸化 MEK1（Ser298）的检测

HeLa 细胞在 T175 培养瓶中培养，待汇合度达到 80% 时，移除细胞培养基并加入 3mL 完全裂解缓冲液（1X）。在轻轻振荡条件下完成 30 分钟的裂解步骤，随后收集裂解物并进行稀释。将 16µL 各稀释度的裂解物转移至 384 孔板中，用于磷酸化 MEK1（Ser298）的检测。

Detection of phospho MEK1 on Hela cells

规格参数

其他规格

应用领域：细胞信号传导
自动化兼容性：是
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
兼容裂解缓冲液：1 号裂解缓冲液、2 号裂解缓冲液、3 号裂解缓冲液
分子修饰类型：磷酸化
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术原理：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：心血管、神经科学、肿瘤与炎症
单位规格：500 次检测

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货号：64MEK1S98PEG

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