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HTRF (H) MEK1 P-S298 KIT - 50K PTS

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品牌： Revvity

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概述

磷酸化 MEK1（Ser298）试剂盒可检测内源性在 Ser298 位点发生磷酸化的 MEK1 蛋白，为研究 MAPK/ERK 通路中的 RAS-RAF-MEK 级联反应提供助力。这种双重特异性丝裂原活化蛋白激酶经 RAF 磷酸化后，负责对 ERK 进行磷酸化 ——ERK 是细胞增殖、存活和分化通路中最重要的信号节点及蛋白激酶之一。

工作原理

磷酸化 MEK1（Ser298）检测原理

磷酸化 MEK1（Ser298）检测用于测量在 Ser298 位点发生磷酸化的 MEK1。与蛋白质印迹法不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。磷酸化 MEK1（Ser298）检测使用两种抗体：一种标记有供体荧光团，另一种标记有受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能识别该蛋白质，且不受其磷酸化状态的影响。蛋白质磷酸化会促使形成包含两种标记抗体的免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团靠近，从而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。该信号的强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比，且无需洗涤步骤即可评估蛋白质的磷酸化状态。

磷酸化 MEK1（Ser298）细胞检测原理

磷酸化 MEK1（Ser298）双板检测方案

双板方案的流程为：先在 96 孔板中培养细胞，然后进行裂解，再将裂解物转移至 384 孔小体积检测板中，之后加入磷酸化 MEK1（Ser298）HTRF 检测试剂。该方案能够监测细胞的活力和汇合度。

磷酸化 MEK1（Ser298）双板检测方案

磷酸化 MEK1（Ser298）单板检测方案

使用 HTRF 试剂检测磷酸化 MEK1（Ser298）可在单个用于培养、刺激和裂解的板中进行，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现微型化，同时保持稳定的 HTRF 质量。

总 MEK 单板检测方案工作原理

检测验证

HeLa 细胞中磷酸化 MEK1（Ser298）的检测

在 T175 培养瓶中培养 HeLa 细胞。当细胞汇合度达到 80% 时，移除细胞培养基，加入 3mL 完全裂解缓冲液（1X）。在轻轻振荡的条件下进行 30 分钟的裂解。然后收集裂解物并进行稀释。将各稀释液取 16µL 转移至 384 孔板中，用于检测磷酸化 MEK1（Ser298）。

HeLa 细胞中磷酸化 MEK1 的检测

规格

其他规格

应用：细胞信号传导
兼容自动化：是
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
兼容的裂解缓冲液：裂解缓冲液 1、裂解缓冲液 2、裂解缓冲液 3
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样品体积：16µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：心血管疾病、神经科学、肿瘤学与炎症
单位规格：500 个检测点

没有数据

货号：64MEK1S98PEY

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