当前位置：首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF RSK1 P-S380 KIT - 50K PTS

HTRF RSK1 P-S380 KIT - 50K PTS

分享给好友

rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_US rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_UK rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_SPA rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_ITA rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_ELL rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_DEU rvty_ls_sds_64RSK1S0PEG_FRA

收藏咨询

品牌： Revvity

产品详情
相关解决方案
相关资源
相关视频
相关问答

概述

磷酸化 RSK1（S380）细胞检测试剂盒旨在通过简化的 “混合即读、无需洗涤” 流程，直接对磷酸化 RSK1 进行稳定定量。RSK1 在细胞增殖和分化中起着关键作用。该试剂盒可用于从基础研究到高通量药物筛选等多个领域，其多功能性使其适用于多种应用场景，涵盖基础研究以及细胞模型中的药理学问题分析。

工作原理
磷酸化 RSK1（S380）检测原理
磷酸化 RSK1（S380）检测可测定丝氨酸 380 位点的 RSK1 磷酸化水平。与蛋白质印迹法（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板进行，无需凝胶、电泳或转膜步骤。总 RSK1 检测使用两种标记抗体：一种带有供体荧光团，另一种带有受体荧光团。第一种抗体经筛选可特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体则能识别蛋白质，且不受其磷酸化状态影响。蛋白质磷酸化会促使形成包含两种标记抗体的免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团接近，从而产生 FRET 信号。信号强度与样品中磷酸化蛋白质的浓度直接成正比，为在无需洗涤的检测格式中评估蛋白质的磷酸化状态提供了一种方法。

磷酸化 RSK1（S380）双板检测方案
双板方案包括先在 96 孔板中培养细胞，然后进行裂解。之后将裂解物转移到 384 孔小体积检测板中，再加入 HTRF 磷酸化 RSK1（S380）检测试剂。该方案能够监测细胞活力和汇合度。

磷酸化 RSK1（S380）单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测磷酸化 RSK1（S380）可在单个板中完成，该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案能够实现微型化，同时保持稳定的 HTRF 检测质量。

检测验证
EGF 刺激的 A431 细胞中总 RSK1 和磷酸化 RSK1（S380）的检测
将 A431 细胞以 100 µl 的量接种到 96 孔板中（80,000 个细胞 / 孔），使用完全培养基，在 37°C、5% CO₂条件下孵育过夜。次日，用 50 µl 不同浓度的 EGF 处理细胞，在 37°C、5% CO₂条件下孵育 5 分钟。移除培养基后，用 100 µL 补充的 2 号裂解缓冲液在室温下轻轻振荡裂解细胞 30 分钟，然后将 16 µL 裂解物转移到小体积白色微孔板中，再加入 2 µL HTRF D2 检测试剂和 2 µL HTRF Eu-K 检测试剂。在单独的孔中对总 RSK1 和磷酸化 RSK1 S380 进行定量。孵育过夜后记录 HTRF 信号。

简化通路
RSK1 的功能与调控
核糖体蛋白 S6 激酶 α-1（RSK1）是 MAP 激酶和 ERK 信号通路的下游组分，作为丝氨酸 / 苏氨酸激酶，参与转录因子的调控以及细胞增殖、存活和分化过程。

其初始激活是由 MAPK1/ERK 在 Thr359/Ser363 位点进行磷酸化，随后在 Ser380 位点发生自磷酸化，这使得 PDK1 能够结合。

规格参数

其他规格参数
应用领域：细胞信号传导
兼容自动化：是
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
兼容的裂解缓冲液：2 号裂解缓冲液
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白质
靶标物种：人、小鼠
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：传染病、代谢 / 糖尿病、肿瘤与炎症、罕见病
单位规格：500 个检测点

没有数据

货号：64RSK1S0PEY

一键复制

参考价格 ¥ 545226.97

产品规格

请咨询￥545226.97

参考货期：3-4周

选择数量

当前规格1件起购

加入购物车询价