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HTRF (H) AGGREG A-SYNU P-S129 - 50K PTS

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概述

监测 α- 突触核蛋白的磷酸化和聚集状态对于研究突触核蛋白病的发病机制具有重要意义。突触核蛋白病是一组神经退行性疾病，包括帕金森病（PD）、路易体痴呆（DLB）、弥漫性路易体病（DLBD）和多系统萎缩（MSA）。该试剂盒提供了一种快速检测和定量细胞培养物或脑组织提取物中人 α- 突触核蛋白聚集体的解决方案。

工作原理

HTRF 人源聚集型磷酸化 α- 突触核蛋白 Ser129 检测原理

α- 突触核蛋白聚集体的检测采用夹心免疫分析法，该方法使用一种抗 α- 突触核蛋白单克隆抗体，该抗体特异性识别标记有铽 - 穴状化合物或 d2 的磷酸化 Ser129α- 突触核蛋白聚集体，可确保检测质量、重现性和信号质量。所产生的特异性 HTRF 信号与 α- 突触核蛋白聚集体的数量成正比。

assay-principle-how-it-works-alpha-synuclein-aggr-phosphos129-64syn29agpeg-64syn29agpeh-64syn29agpey.svg（α- 突触核蛋白聚集型磷酸化 Ser129 检测原理.svg）

HTRF 人源聚集型磷酸化 α- 突触核蛋白 Ser129 检测方案

将样品或脑组织提取物转移至检测板中，以检测 α- 突触核蛋白聚集体。标记有 HTRF 荧光团的抗体可预先混合，并通过单次加样步骤加入，以进一步简化检测流程。通过按比例调整每次加样体积，该检测可在 96 孔至 384 孔板中进行。

assay-protocol-how-it-works-alpha-synuclein-aggr-phosphos129-64syn29agpeg-64syn29agpeh-64syn29agpey.svg（α- 突触核蛋白聚集型磷酸化 Ser129 检测方案.svg）

检测验证

聚集型磷酸化 α- 突触核蛋白 Ser129 检测的验证

通过聚集型磷酸化 α- 突触核蛋白（S129）制备样品，并经排阻相（G25）纯化，得到 3 个峰，分别对应磷酸化 α- 突触核蛋白的寡聚体、二聚体和单体。

将每个纯化后的样品进行 14 次连续稀释，以 16 µL / 孔的体积加入小体积白色微孔板中。

加入 2 µL HTRF d2 检测试剂和 2 µL HTRF 铕 - 铽检测试剂，在室温下孵育过夜后记录信号。

结果显示，仅能显著检测到寡聚体聚集体。对二聚体聚集体检测的进一步分析显示，其信号较弱但仍可检测到。单体未被检测到，这表明该检测仅对聚集体具有特异性。

assay-validation-alpha-synuclein-aggr-phosphos129-64syn29agpeg-64syn29agpeh-64syn29agpey-01.svg（α- 突触核蛋白聚集型磷酸化 Ser129 检测验证 01.svg）
assay-validation-alpha-synuclein-aggr-phosphos129-64syn29agpeg-64syn29agpeh-64syn29agpey-02.svg（α- 突触核蛋白聚集型磷酸化 Ser129 检测验证 02.svg）

规格参数

其他规格参数

应用领域：细胞信号传导
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
兼容的裂解缓冲液：5 号裂解缓冲液
分子修饰：磷酸化
产品类别：试剂盒
样品体积：16 µL
运输条件：干冰运输
靶标类别：磷酸化蛋白
靶标物种：人
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
单位规格：500 个检测点

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货号：64SYN29AGPEY

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