HTRF ERK P-T202/Y204 KIT - 500 PTS 磷酸化ERK测量试剂盒 - 500测试

概述
磷酸化细胞外信号调节激酶（ERK）检测试剂盒旨在对 ERK 的调节情况进行可靠的定量分析，检测其在苏氨酸 202 / 酪氨酸 204（Thr202/Tyr204）位点的磷酸化状态，可用于针对 G 蛋白偶联受体（GPCR）和受体酪氨酸激酶（RTK）的筛选，作为丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的读数。简单的混合后读数方案省去了所有的洗涤步骤，能够实现更快速的分析并获得高质量的检测结果。

规格
其他规格

作用原理
磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测原理
磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测用于测量 ERK 在 Thr202/Tyr204 位点的磷酸化情况。与蛋白质免疫印迹（Western Blot）不同，该检测完全基于微孔板，无需凝胶、电泳或转膜步骤。磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测使用两种标记抗体：一种标记有供体荧光团，另一种标记有受体荧光团。第一种抗体经筛选后能特异性结合蛋白质上的磷酸化基序，第二种抗体可识别该蛋白质，且不受其磷酸化状态的影响。蛋白质磷酸化促使两种标记抗体形成免疫复合物，使供体荧光团与受体荧光团紧密靠近，从而产生荧光共振能量转移（FRET）信号。该信号强度与样品中存在的磷酸化蛋白浓度直接成正比，并且在无需洗涤的检测形式下提供了一种评估蛋白质磷酸化状态的方法。

磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测原理图示

磷酸化 ERK 双板检测方案
双板检测方案包括先在 96 孔板中培养细胞，然后进行裂解，在加入磷酸化 ERK HTRF 检测试剂之前，将细胞裂解物转移至 384 孔低体积检测板中。该方案能够对细胞活力和汇合度进行监测。

磷酸化 ERK 单板检测方案
使用 HTRF 试剂检测磷酸化 ERK 可在单个用于培养、刺激和裂解细胞的板中进行，无需洗涤步骤。这种为高通量筛选（HTS）设计的方案在实现小型化的同时，保持了 HTRF 检测的高质量。

简化通路
MAPK/ERK 细胞信号传导
MAPK/ERK 信号级联可被多种参与生长和分化的受体激活。核心信号转导级联引发对众多细胞过程的调节，包括黏附、迁移、凋亡、分化和代谢。MEK1/2 催化 ERK1/2 在酪氨酸 204 和苏氨酸 202 位点的磷酸化。作为响应，ERK 磷酸化数百种细胞质和细胞核底物。MAPK 信号传导的高度复杂性和多样性使 ERK 成为生物学中的关键调节因子和主要信号节点。

磷酸化 ERK（Thr202/Tyr204）检测原理图示