品牌: Revvity
概述
总α-突触核蛋白细胞检测试剂盒旨在监测α-突触核蛋白(包括磷酸化和非磷酸化形式)的表达水平。该试剂盒使用与我们的磷酸化α-突触核蛋白试剂盒相同的缓冲液,能够从单个样本中同时分析磷酸化和总蛋白,从而更好地理解α-突触核蛋白介导的发病机制。
α-突触核蛋白与突触核蛋白病的发生发展相关,突触核蛋白病是一组神经退行性疾病,包括帕金森病(PD)、路易体痴呆(DLB)、弥漫性路易体病(DLBD)和多系统萎缩(MSA)。
工作原理
总α-突触核蛋白检测原理
总α-突触核蛋白检测可对细胞裂解物中突触核蛋白的表达水平进行定量。与蛋白质印迹法不同,该检测完全基于微孔板,无需凝胶、电泳或转膜步骤。
总α-突触核蛋白检测使用两种标记抗体:一种偶联供体荧光团,另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在突触核蛋白时,添加这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团接近,从而产生FRET信号。其强度与样本中蛋白质的浓度直接相关,并提供了一种在无需洗涤的检测格式中评估蛋白质表达的方法。
总突触核蛋白双板检测方案
双板方案包括先在96孔板中培养细胞,然后进行裂解,再将裂解物转移到384孔小体积检测板中,之后添加总突触核蛋白HTRF检测试剂。
该方案能够监测细胞活力和汇合度。
phospho-how-it-works-total-alpha-synuclein-2-plate-assay-protocol(磷酸化-总α-突触核蛋白双板检测方案)
总α-突触核蛋白单板检测方案
使用HTRF试剂检测总α-突触核蛋白可在单个板中完成,该板可用于细胞培养、刺激和裂解。无需洗涤步骤。
这种为高通量筛选(HTS)设计的方案能够实现微型化,同时保持稳定的HTRF检测质量。
检测验证
通过HTRF定量的α-突触核蛋白水平在HeLa细胞中比在SH-SY5Y细胞中更丰富 将HeLa细胞和SH-SY5Y细胞接种后,在37°C、5% CO₂条件下培养至汇合。 细胞裂解后,将裂解物进行系列稀释。然后使用BCA试剂对总蛋白含量进行定量,同时使用HTRF总α-突触核蛋白细胞检测试剂盒对α-突触核蛋白进行定量。 特异性定量α-突触核蛋白,而非β-突触核蛋白 HTRF总α-突触核蛋白检测不会检测到β-突触核蛋白。简化通路
帕金森病通路与α-突触核蛋白的作用 在突触核蛋白病患者的大脑中,α-突触核蛋白是细胞内纤维状聚集体的主要成分。 该蛋白是帕金森病、路易体痴呆或多系统萎缩的关键分子标志。α-突触核蛋白在Ser129位点的广泛磷酸化也与病理事件相关。规格
其他规格 应用:细胞信号传导 品牌:HTRF 检测方式:HTRF 裂解缓冲液兼容性:裂解缓冲液1、裂解缓冲液2、裂解缓冲液3、裂解缓冲液4、裂解缓冲液5 分子修饰:总蛋白 产品类别:试剂盒 样本体积:16 µL 运输条件:干冰运输 靶标类别:磷酸化蛋白 靶标物种:人 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET) 治疗领域:神经科学 单位规格:500次检测