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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Phosphoproteins > HTRF A-SYNUCLEIN TOTAL KIT - 10K PTS 总Alpha -突触核蛋白测量试剂盒-10,000测试

概述

总α-突触核蛋白细胞检测试剂盒旨在监测磷酸化和非磷酸化形式的α-突触核蛋白的表达水平。它使用与我们的磷酸化α-突触核蛋白试剂盒相同的缓冲液,能够从单个样本中同时分析磷酸化蛋白和总蛋白,从而更好地理解由α-突触核蛋白介导的发病机制。 α-突触核蛋白与突触核蛋白病的发生发展相关,这类神经退行性疾病包括帕金森病(PD)、路易体痴呆(DLB)、弥漫性路易体病(DLBD)和多系统萎缩(MSA)。工作原理

总α-突触核蛋白检测原理 总α-突触核蛋白检测可定量细胞裂解物中突触核蛋白的表达水平。与蛋白质印迹法不同,该检测完全基于微孔板,无需凝胶、电泳或转膜步骤。 总α-突触核蛋白检测使用两种标记抗体:一种偶联供体荧光团,另一种偶联受体荧光团。两种抗体都对该蛋白上的特定表位具有高度特异性。当细胞提取物中存在突触核蛋白时,加入这些偶联物会使供体荧光团与受体荧光团接近,从而产生FRET信号。其强度与样本中蛋白质的浓度直接成正比,并且在无需洗涤的检测格式下即可评估蛋白质的表达。 总突触核蛋白双板检测方案 双板方案包括:先在96孔板中培养细胞,然后裂解细胞,将裂解物转移到384孔小体积检测板中,再加入总突触核蛋白HTRF检测试剂。 该方案能够监测细胞活力和汇合度。 总α-突触核蛋白单板检测方案 使用HTRF试剂检测总α-突触核蛋白可在单个板中完成,该板可用于细胞培养、刺激和裂解,无需洗涤步骤。 这种为高通量筛选(HTS)设计的方案能够实现小型化,同时保持稳定的HTRF检测质量。检测验证

通过HTRF定量发现,Hela细胞中的α-突触核蛋白水平高于SH-SY5Y细胞 将Hela细胞和SH-SY5Y细胞接种后,在37°C、5% CO₂条件下培养至汇合。 细胞裂解后,将裂解物进行系列稀释。然后使用BCA试剂定量总蛋白含量,同时使用HTRF总α-突触核蛋白细胞检测试剂盒定量α-突触核蛋白。 特异性定量α-突触核蛋白,而非β-突触核蛋白 HTRF总α-突触核蛋白检测不会检测到β-突触核蛋白。简化通路

帕金森病通路与α-突触核蛋白的作用 在突触核蛋白病患者的大脑中,α-突触核蛋白是细胞内纤维状聚集体的主要成分。 该蛋白是帕金森病、路易体痴呆或多系统萎缩的关键分子标志。α-突触核蛋白在Ser129位点的广泛磷酸化也与病理过程相关。规格

其他规格 应用 细胞信号传导 品牌 HTRF 检测方式 HTRF 裂解缓冲液兼容性 裂解缓冲液1 裂解缓冲液2 裂解缓冲液3 裂解缓冲液4 裂解缓冲液5 分子修饰 总(蛋白) 产品类别 试剂盒 样本体积 16 µL 运输条件 干冰运输 目标类别 磷蛋白 目标物种 人 技术 时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET) 治疗领域 神经科学 单位规格 10,000个检测点

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