品牌: Revvity
该产品的活性成分源自兔抗小鼠免疫血清,其中的免疫球蛋白 G(IgG)经免疫纯化工艺处理后,标记铽(Tb)元素构成的铽穴状化合物,形成高特异性、高灵敏度检测试剂 —— 多克隆抗体抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物(PAb Anti Mouse IgG-Tb Cryptate)。该试剂可精准检测未标记的小鼠特异性抗体与靶分子,或免疫球蛋白融合蛋白之间的结合反应,为小鼠源分子相互作用研究提供可靠工具。HTRF 技术支持该试剂在生化与细胞两种实验体系中应用,能够广泛覆盖多种类型的相互作用研究,包括蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子及受体 / 配体相互作用。依托技术核心优势,其可检测的亲和力常数范围覆盖皮摩尔(picomolar)至低毫摩尔(low millimolar)级别,灵活适配不同强度的分子相互作用分析场景,满足基础生物学研究、药物研发、中等规模筛选等多样化需求。
在 HTRF 相互作用检测体系中,参与相互作用的两种分子需分别通过直接或间接方式标记供体荧光团与受体荧光团,检测产生的信号强度与两者的结合程度呈正相关。本试剂的典型应用示例:多克隆抗体抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物与带小鼠 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合,而分子 B * 则与标记 HTRF 受体的特异性抗体结合。若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合等修饰,可选用对应的 HTRF 受体标记试剂(如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等)完成检测,确保实验灵活性与适用性。(标注:HTRF PAb Anti Mouse IgG-Tb cryptate 1.svg 为图表标识,对应 “抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物 HTRF 检测原理”)
以下为终反应体积 20 µL 的标准检测流程,适用于检测带小鼠 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 的相互作用,具体步骤如下:
若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合修饰或直接标记,需替换为对应的 HTRF 受体标记试剂(如抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等)进行检测,适配不同实验设计需求。(标注:HTRF PAb Anti Mouse IgG-Tb cryptate 2.svg 为图表标识,对应 “抗小鼠 IgG - 铽穴状化合物 HTRF 检测流程”)
每孔偶联物的平均用量反映总生物材料负载量,实际应用中优先参考活性成分含量(而非总偶联物质量)更具科学性。对于铽穴状化合物(Cryptate)和 d2 标记偶联物,由于标记物分子量极小可忽略不计,总偶联物量与活性成分量基本一致;而 XL665 标记偶联物的总偶联物量会因 XL665 与抗体的最终摩尔偶联比不同而变化,但 Revvity 提供的活性成分量恒定,且严格匹配订购的检测次数(5,000 次检测规格),确保实验重复性与结果可靠性。(标注:HTRF PAb Anti Mouse IgG-Tb cryptate 3.svg 为图表标识,对应 “检测次数与活性成分关联说明”)