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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Prot-prot interac > HTRF MAB ANTI HA-D2 - 5K PTS 凝集素d2测量试剂- 5,000测试

产品概述

抗 HA-d2 单克隆抗体为 IgG2b 型,针对十二氨基酸肽序列 CYPYDVPDYASL 制备并标记 d2。该抗体可识别流感病毒血凝素表位(YPYDVPDYA),该表位已广泛用作表达载体中的通用表位标签。该试剂适用于生化和细胞水平的多种相互作用研究,包括蛋白 / 蛋白、蛋白 / 肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体相互作用。均相时间分辨荧光技术可检测的亲和力常数范围广泛,涵盖皮摩尔至低毫摩尔级别。(标注:htrf mab anti ha-d2,对应 “抗 HA-d2 单克隆抗体检测原理示意图”)

工作原理

检测原理

在均相时间分辨荧光相互作用检测中,一个结合伴侣(直接或间接)标记供体,另一个标记受体(直接或间接)。信号强度与两个伴侣的结合程度成正比。示例流程:抗 HA-d2 单克隆抗体与 HA 标签标记的结合伴侣 A 结合,而结合伴侣 B 与标记均相时间分辨荧光供体的特异性抗体结合。结合伴侣 B 也可进行生物素化、标签标记、Fc 融合修饰,此时需使用相应的均相时间分辨荧光试剂(抗标签抗体、抗物种抗体、蛋白 A、链霉亲和素)标记供体进行检测。

检测流程

以 20 微升最终反应体积检测 HA 标签标记的结合伴侣 A 与非标记结合伴侣 B 的相互作用为例:加入两种结合伴侣(10 微升),孵育后加入抗 HA-d2 单克隆抗体(5 微升)和标记供体的抗结合伴侣 B 抗体(5 微升),孵育后读取信号。结合伴侣 B 也可进行生物素化、标签标记、Fc 融合修饰或直接标记,此时需使用相应的均相时间分辨荧光试剂(抗标签抗体、抗物种抗体、蛋白 A、链霉亲和素)标记供体进行检测。(标注:htrf mab anti ha-d2,对应 “抗 HA-d2 单克隆抗体检测流程示意图”)

检测详情

定制化均相时间分辨荧光相互作用检测

试剂按检测次数(20 微升反应体系)销售。偶联 XL665 或 d2 的抗体按每孔 20 纳克抗体供应,每瓶提供活性部分含量及示踪剂数量。活性部分指偶联物的活性成分。

检测次数与活性部分的关系

每孔平均偶联物量反映总生物材料含量,优先使用活性部分含量而非总偶联物量。铕穴状化合物和 d2 偶联物的总偶联物量等于活性部分含量(标记物分子量可忽略);XL665 标记物的总偶联物量因摩尔比不同而异,但活性部分含量恒定,基于订购的检测次数确定。

推荐使用浓度

铕穴状化合物偶联物浓度需避免过高导致读数仪饱和及背景过高,多数情况下 1-5 纳摩尔浓度适宜,在兼容均相时间分辨荧光的读数仪上 620 纳米处可产生 20,000-80,000 计数 / 秒。XL665 偶联物浓度需尽可能与检测对应物匹配,确保最大数量的生物分子被 XL665 受体标记。检测 20 纳摩尔浓度的标记分子时,抗标签 - XL665 浓度应相当或更高。

产品规格

  • 应用领域:蛋白 - 蛋白相互作用检测
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF
  • 产品类别:荧光试剂
  • 运输条件:干冰运输
  • 靶标类别:结合检测
  • 技术平台:TR-FRET
  • 治疗领域:心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
  • 单位规格:5,000 次检测


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