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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Second messengers > HTRF IP-ONE GQ KIT - 100K PTS 磷酸肌醇测量试剂盒-100,000测试

概述

均相时间分辨荧光(HTRF)肌醇一磷酸(IP-One)检测试剂盒可检测肌醇一磷酸(inositol monophosphate,IP1)的积累情况。肌醇一磷酸是磷脂酶 C(phospholipase C,PLC)信号级联反应激活后,由肌醇三磷酸(IP3)生成的一种稳定下游代谢产物。本试剂盒可直接分析作用于 Gq 偶联受体的各类化合物,适用于贴壁细胞与悬浮细胞两种细胞模型。


从高通量筛选(high-throughput screening,HTS)到构效关系(structure-activity relationships,SAR)研究,肌醇一磷酸(IP-One)检测已被证实相比传统检测方法具有显著优势。

工作原理

检测原理

本试剂盒采用竞争结合法设计,包含两种关键成分:一是标记有穴状化合物(供体)的特异性抗体,二是与 d2 荧光团(受体)偶联的肌醇一磷酸(IP1)。细胞自身产生的内源性肌醇一磷酸(IP1)会与 d2 标记的肌醇一磷酸(IP1)竞争结合抗肌醇一磷酸(IP1)铽(Tb²⁺)穴状化合物单克隆抗体。在细胞刺激缓冲液中需添加氯化锂(LiCl),氯化锂可使受体激活后产生的肌醇一磷酸(IP1)在细胞内积累。


检测流程

肌醇一磷酸(IP-One)检测试剂盒的流程经过简化,仅需两步孵育操作:


  1. 配体或目标化合物刺激细胞
  2. 使用 HTRF 试剂检测肌醇一磷酸(IP1)水平


该流程中,细胞经刺激后仅需一次孵育,且孵育时间仅为 1 小时。


检测详情

肌醇一磷酸(IP-One)-Gq 检测的特异性

肌醇一磷酸(IP-One)检测可确保信号特异性,仅对肌醇一磷酸(IP1)进行定量。肌醇一磷酸(IP1)是唯一由磷脂酶(PLC)作用生成、且通过 G 蛋白偶联受体(GPCR)介导产生的分析物。


相比之下,钙信号反应本质上更为复杂。钙释放常由非 G 蛋白机制触发,包括钙(Ca²⁺)通透性通道、钙泵及钙转运体等。

标准曲线特征

检测窗口、灵敏度、重复性与特异性:肌醇一磷酸(IP-One)检测在这些关键指标上均表现出色,无任何性能妥协!


规格参数

其他规格

类别详情
应用领域(Application)第二信使检测(Second Messenger Detection)
品牌(Brand)HTRF
检测方式(Detection Modality)均相时间分辨荧光(HTRF,Homogeneous Time-Resolved Fluorescence)
产品类别(Product Group)试剂盒(Kit)
样本体积(Sample Volume)14 微升(14 µL)
运输条件(Shipping Conditions)常温运输(Shipped Ambient)
目标类别(Target Class)G 蛋白偶联受体(GPCR,G Protein-Coupled Receptor)
技术(Technology)时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET,Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer)
治疗领域(Therapeutic Area)心血管疾病(Cardiovascular)、感染性疾病(Infectious Diseases)、代谢 / 糖尿病(Metabolism/Diabetes)、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化(NASH/Fibrosis)、神经科学(Neuroscience)、肿瘤与炎症(Oncology & Inflammation)、罕见病(Rare Diseases)
单位规格(Unit Size)100,000 个检测点(100,000 assay points)


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