概述
5-HT4 受体是一种位于突触后的 G 蛋白偶联受体(GPCR),在大脑中的密度最高。5-HT4 G 蛋白偶联受体在学习和记忆过程中发挥作用。
表达 5HT4 受体的细胞已预先用铽标记,可用于对上述受体进行受体结合研究。
工作原理
检测原理
使用 Tag-lite 进行 5HT4 受体结合检测非常简便。只需向每个孔中加入 10 µL 标记细胞,然后加入 5 µL 标记配体和 5 µL 待测试化合物即可。与所有 HTRF 检测一样,Tag-lite 检测无需任何洗涤步骤。右侧给出了需遵循的检测流程示意图。
饱和结合(KD)
饱和结合检测用于在平衡条件下,针对浓度不断增加的配体,测量总结合和非特异性结合。进行该检测时,将荧光配体滴定到含有固定量标记细胞的溶液中,然后孵育至平衡。通过这种滴定获得的 HTRF 比值即为总结合。
竞争性结合(KI)
竞争性结合检测用于测量解离常数(Ki)。进行该检测时,将化合物滴定到含有固定浓度荧光配体和固定量细胞的溶液中。
检测验证
Kd 和 Ki 验证
使用血清素 5HT4 标记细胞及其匹配的荧光配体(L0043RED)所获得的数据示例。GR-113808 被用作参考配体。不同的 HTRF® 兼容读数仪得出的结果可能有所不同。
- 应用领域:受体 - 配体结合
- 品牌:Tag-lite
- 检测方式:HTRF
- 产品类别:细胞
- 运输条件:干冰运输
- 靶标类别:G 蛋白偶联受体(GPCR)
- 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
- 治疗领域:心血管疾病、传染病、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
- 单位规格:200 个检测点