过去几年间,SNAP 标签(SNAP-Tag)、CLIP 标签(CLIP-Tag)与 Halo 标签(Halo-Tag)技术,结合时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)技术,为多种非放射性、免清洗结合测定法的开发奠定了基础。该方法的原理是:利用编码 SNAP 标签(或 CLIP 标签、Halo 标签)的质粒转染细胞,随后用受体分子或供体分子对细胞进行标记。SNAP - 铽荧光试剂(SNAP-Lumi4-Tb)可通过铽荧光团对带有 SNAP 标签的蛋白质进行标记。
SNAP 标签(SNAP-tag®)是一种小型融合标签,能与特定底物发生共价相互作用。借助 SNAP 标签,可对任意目标蛋白质进行特异性共价标记。提供的细胞为未标记状态,在开展结合测定前,需用铽荧光试剂(Lumi4-Terbium)对其进行标记。标记试剂可从瑞孚迪(Revvity)产品目录中获取,共有 4 种不同规格。如需了解更多细节,请参考标记操作流程。
G 蛋白偶联受体(GPCR)工作原理:受体标记化学反应(SSNPTBC,即 S-(2-(4 - 硝基苯基)乙基)-2 - 氯乙酰胺)