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当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > Cytokines > HTRF HUMAN CCL5 KIT - 10K PTS

概述


CCL5,也称为 RANTES(受调节激活正常 T 细胞表达和分泌因子),是一种主要由 T 淋巴细胞、巨噬细胞、血小板和某些类型肿瘤细胞分泌的趋化因子。RANTES 通过招募 T 细胞和巨噬细胞在炎症部位发挥重要作用。当与 IL-2 和 IFN-γ 一起分泌时,RANTES 还能诱导自然杀伤(NK)细胞的活化和增殖。RANTES 在肿瘤学中的功能尚不清楚,但在感染性疾病中,已有研究表明 RANTES 可抑制 HIV 进入靶细胞。


血清样本的评估通常需要更高的灵敏度。在某些情况下,AlphaLISA 检测可能具有足够的灵敏度,能够检测出血清或血浆中的低水平分析物。


工作原理
检测原理
细胞上清液、样本或标准品直接加入检测板中,通过 HTRF® 试剂进行检测(使用 384 孔小容量白色板或 Revvity 小容量 96 孔板,反应体积为 20 µl)。标记有 HTRF 供体和受体的抗体预先混合,通过单次加样步骤加入,以进一步简化检测流程。通过按比例调整每次添加的体积,该检测可扩展至 1536 孔板格式。


细胞因子检测工作原理
检测数据分析
四参数 logistic(4PL)曲线通常被推荐用于拟合 ELISA 标准曲线。与线性分析相比,这种回归方法能够在更宽的浓度范围内准确测量未知样本,非常适合分析细胞因子释放等生物系统。


Revvity 还与Myassays.com合作,为您的数据分析提供帮助。


检测详情
人 CCL5 试剂盒的技术规格
样本量:16 µL
最终检测体积:20 µL
试剂盒组成:冻干标准品、冷冻检测抗体、缓冲液和实验方案
检测限和定量限(在稀释液中):7 pg/mL 和 18 pg/mL
检测范围:18–2,000 pg/mL
出结果时间:室温下过夜
校准:NIBSC(92/520)值(IU/mL)= 0.015 × HTRF 人 CCL5 值(pg/mL)
物种:仅限人类


分析性能
批内和批间检测
批内检测(n=24)


样本CCL5 平均值(pg/mL)变异系数
1747%
24177%
310446%

平均变异系数7%


批间检测(n=4)


样本CCL5 值(pg/mL)平均值(delta 比值)变异系数
16232012%
2256121413%
3100844055%


平均变异系数10%


检测验证
经 LPS、IL1ß 和 TNFa 刺激的 PBMC 中 CCL5 的分泌
将 PBMC 以 100,000 个细胞 / 孔的密度接种到 96 孔板中,分别用 200 µg/mL 的 LPS、10 ng/mL 的 IL1ß 和 10 ng/mL 的 TNFa 刺激 24 小时。将上清液稀释至 1/3,取 16 µL 稀释后的样本转移至 384 孔(SV)白色检测板中,通过人 CCL5 检测试剂盒进行分析。


人 CCL5 检测验证
经 TGFß 刺激的 LX2 细胞中 CCL5 的分泌
将 LX2 细胞以 400,000 个细胞 / 孔的密度接种到 6 孔板中,培养 3 天,然后饥饿 1 天,再用 0.5ng/ml 的 TGFß 刺激 48 小时。随后,取 16 µL 上清液转移至 384 孔(SV)白色检测板中,通过人 CCL5 检测试剂盒进行分析。


人 CCL5 检测验证


规格


其他规格
应用:蛋白质定量
品牌:HTRF
检测方式:HTRF
产品类别:试剂盒
样本体积:16 µL
运输条件:干冰运输
靶标类别:细胞因子
靶标物种:人类
技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
治疗领域:代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、肿瘤学与炎症
单位规格:10,000 个检测点


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