HTRF PAB ANTI RABBIT IGG-EU - 20K PTS Eu(K)标记的兔免疫球蛋白测试蛋白- 20,000测试

产品概述

该产品的核心活性成分为源自山羊抗兔免疫血清的免疫球蛋白 G（IgG），经免疫纯化工艺提纯后，标记铕（Eu）构成的铕穴状化合物，最终制成高特异性荧光检测试剂 —— 多克隆抗体抗兔 IgG - 铕穴状化合物。需特别说明的是，工作原理与检测流程中提及的 “PAb Anti Rabbit IgG-Tb cryptate” 为表述偏差，实际发挥检测作用的是铕穴状化合物标记抗体。该试剂可精准检测未标记的兔特异性抗体与靶分子、免疫球蛋白融合蛋白之间的结合反应，适配生化与细胞两种实验体系，能广泛支持蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子及受体 / 配体等多种分子间相互作用的研究。依托 HTRF 技术核心优势，其可检测的亲和力常数范围覆盖皮摩尔至低毫摩尔级别，适配大规模实验场景，能满足药物研发大规模筛选、批量生物学样本分析等多样化科研需求。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，参与反应的两种分子需分别通过直接或间接方式标记供体荧光团和受体荧光团，检测产生的信号强度与两者结合程度呈正相关。该试剂的典型应用场景为：多克隆抗体抗兔 IgG - 铕穴状化合物与带兔 Fc 融合标签的分子 A 特异性结合，分子 B * 则与标记 HTRF 受体的特异性抗体相结合。若分子 B 经过生物素化、带标签、Fc 融合等修饰，可选用抗标签抗体、抗种属抗体、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 受体标记试剂完成检测，适配不同实验设计需求。（标注：HTRF PAb Anti Rabbit IgG-Eu cryptate 1.svg 对应 “抗兔 IgG - 铕穴状化合物 HTRF 检测原理示意图”）

检测流程

以下为终反应体积 20 µL 的标准检测流程，专门用于检测带兔 Fc 融合标签的分子 A 与非标记分子 B * 的相互作用，具体步骤如下：

1. 向检测板内加入两种待检测相互作用的分子，总体积 10 µL，按照实验设定条件完成孵育；
2. 依次加入 5 µL 多克隆抗体抗兔 IgG - 铕穴状化合物和 5 µL 受体标记的抗分子 B 抗体，孵育结束后，利用 HTRF 兼容检测仪读取信号，即可完成检测。

若分子 B 存在生物素化、带标签、Fc 融合修饰或直接标记等情况，需选用对应的 HTRF 受体标记试剂开展检测，保障实验准确性。（标注：HTRF PAb Anti Rabbit IgG-Eu cryptate 2.svg 对应 “抗兔 IgG - 铕穴状化合物 HTRF 检测流程示意图”）

检测详情

检测次数与活性成分的关联

每孔偶联物的平均用量体现了实验中生物材料的总体负载量，相较于总偶联物质量，参考活性成分含量设计实验更为科学。对于铕穴状化合物及 d2 标记的偶联物，由于标记物分子量极小可忽略不计，总偶联物量与活性成分量基本一致；而 XL665 标记的偶联物，其总偶联物量会随 XL665 与抗体的最终摩尔偶联比变化而改变，但 Revvity 提供的该试剂活性成分量恒定不变，且严格匹配订购的 20,000 次检测规格，能有效保障大规模实验结果的稳定性与重复性。（标注：HTRF PAb Anti Rabbit IgG-Eu cryptate 3.svg 对应 “检测次数与活性成分关联说明图”）

铕穴状化合物与 XL665 偶联物的推荐用量

1. 铕穴状化合物偶联物（供体）：用量需严格把控，过量添加易造成检测仪信号饱和、背景信号过高，干扰检测结果准确性。多数实验场景下，1–5nM 的浓度为最佳选择，依据所用 HTRF 兼容检测仪型号不同，该浓度在 620nm 波长下可产生 20,000–80,000 cps（计数 / 秒）的稳定信号。
2. XL665 偶联物（受体）：浓度需尽可能与检测靶点浓度匹配，才能让更多生物分子被 XL665 受体标记。例如，当检测靶点在反应体系中的浓度为 20nM 时，抗标签 - XL665 偶联物的浓度应达到等摩尔及以上水平，进而保障分子结合效率，提升检测信号的特异性和灵敏度。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用检测（Protein-Protein Interaction）
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF（均相时间分辨荧光）
• 产品类别：荧光试剂（Fluorescent Reagent）
• 运输条件：室温运输（Shipped Ambient）
• 靶标类别：生物制品（Biologics）
• 靶标物种：兔（Rabbit）
• 技术平台：TR-FRET（时间分辨荧光共振能量转移）
• 适用治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤学与炎症、罕见病
• 单位规格：20,000 次检测（20,000 assay points）