HTRF MAB ANTI DNP-EU - 20K PTS

产品概述

该产品是针对二硝基苯 - 牛血清白蛋白（DNP-BSA）制备的 IgG1 型单克隆抗体，经铕（Eu）标记后形成抗 DNP - 铕穴状化合物试剂。它对 DNP - 氨基己酸及其他二硝基苯（DNP）衍生物均具备高亲和力，适配生化与细胞两种实验体系，可广泛用于研究蛋白 / 蛋白、蛋白 / 多肽、蛋白 / DNA、蛋白 / RNA、蛋白 / 碳水化合物、蛋白 / 小分子、受体 / 配体等多种分子间的相互作用。借助 HTRF 技术，该试剂能够检测解离常数（Kd）从皮摩尔到低毫摩尔区间内的各类亲和力相互作用，适配不同亲和力强度的分子相互作用研究场景。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测体系中，参与相互作用的两个分子伴侣，需分别通过直接或间接方式标记信号供体与受体，检测到的信号强度和两个伴侣的结合程度呈正相关。具体到该试剂的应用场景：抗 DNP - 铕穴状化合物会特异性结合带有 DNP 标记的结合伴侣 A，而结合伴侣 B 则与标记了 HTRF 受体的特异性抗体相结合。若结合伴侣 B 经过生物素化、标签标记或 Fc 融合等修饰，可选用抗标签、抗种属、蛋白 A、链霉亲和素等对应的 HTRF 受体标记试剂完成检测。（标注：HTRF MAb Anti DNP-Eu cryptate 1.svg，对应 “抗 DNP-Eu cryptate 检测原理示意图”）

检测流程

以 20 微升最终反应体积检测 DNP 标记的结合伴侣 A 与非标记结合伴侣 B 的相互作用为例，具体流程如下：先加入 10 微升两种结合伴侣的混合液并完成孵育；接着加入 5 微升抗 DNP - 铕穴状化合物试剂和 5 微升标记受体的抗结合伴侣 B 抗体；再次孵育后读取荧光信号即可。若结合伴侣 B 为生物素化、标签标记、Fc 融合修饰或直接标记类型，替换为对应的受体标记 HTRF 试剂即可完成适配检测。（标注：HTRF MAb Anti DNP-Eu cryptate 2.svg，对应 “抗 DNP-Eu cryptate 检测流程示意图”）

检测详情

检测次数与活性部分的关联

每孔中偶联物的平均含量可反映体系内生物材料的总体含量，实验中建议优先参考活性部分的含量，而非偶联物总含量。对于铕穴状化合物和 d2 类偶联物，由于标记物分子量极小可忽略不计，偶联物总含量与活性部分含量一致；而 XL665 标记的偶联物，其总含量会随 XL665 偶联物的最终摩尔比变化而波动。不过该试剂的活性部分含量由 Cisbio 精准把控，始终保持恒定，且含量依据订购的检测次数来设定。（标注：HTRF Streptavidin-XLent 3.svg，对应 “检测次数与活性部分关联说明图”）

试剂适配浓度建议

1. 铕穴状化合物偶联物：浓度不可过高，否则会导致读数仪信号饱和，还会产生过高背景信号干扰实验结果。多数情况下，1-5 纳摩尔的浓度最为适宜。搭配兼容 HTRF 的读数仪检测时，该浓度在 620 纳米波长下可产生 20,000-80,000 计数 / 秒的信号。
2. XL665 偶联物：浓度需尽可能与检测体系中对应的目标物浓度匹配，这样才能让更多生物分子被 XL665 受体标记。例如，当检测体系中标记分子浓度为 20 纳摩尔时，抗标签 - XL665 的浓度需达到与之等摩尔及以上水平，以保障检测效果。

产品规格

• 应用领域：蛋白 - 蛋白相互作用及多种分子间相互作用研究
• 品牌：HTRF
• 检测方式：HTRF
• 产品类别：荧光试剂
• 运输条件：常温运输
• 靶标类别：结合检测
• 技术平台：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
• 适用治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
• 单位规格：20,000 次检测