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HTRF STREPTAVIDIN-D2 - 20K PTS D2标记的链霉亲和素- 20，000测试

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品牌： Revvity

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概述

链霉亲和素已用 d2 标记。生物素与链霉亲和素具有高亲和力结合（亲和常数 Ka=10¹⁵M⁻¹）。这种结合迅速且稳定，使其成为多种检测（如酶检测、蛋白质 - 蛋白质结合检测和分子生物学检测）的理想选择。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中，一个结合伙伴（直接或间接）被标记上供体，另一个则标记上受体（同样可直接或间接标记）。信号强度与两个伙伴的结合程度成正比。

本文所示示例中：链霉亲和素 - d2 与生物素化的伙伴 A 结合，而伙伴 B * 与标记有 HTRF 供体的特异性抗体结合。

* 伙伴 B 也可进行标签标记、Fc 融合。在这些情况下，检测时需使用相应的 HTRF 试剂（抗标签、抗物种、蛋白 A、链霉亲和素），且这些试剂需标记供体。

HTRF 链霉亲和素 - d2

检测方案

右侧示例描述了使用 20µL 最终检测体积检测生物素化标签伙伴 A 与非标签伙伴 B * 之间相互作用的方案。

加入两种伙伴（10µL），孵育后，加入链霉亲和素 - d2（5µL）和标记有供体的抗伙伴 B 抗体（5µL），孵育后进行读数。

* 伙伴 B 也可进行标签标记、Fc 融合或直接标记。在这些情况下，检测时需使用相应的 HTRF 试剂（抗标签、抗物种、蛋白 A、链霉亲和素），且这些试剂需标记供体。

HTRF 链霉亲和素 - d2

检测详情

为特定应用构建 HTRF 相互作用检测
试剂按检测次数（20µL 反应体系）销售。XL665 或 d2 偶联物的供应标准为每孔 20ng 抗体。每个小瓶中活性成分的量（以及每个小瓶中示踪物的数量）也会提供（详见产品说明书）。活性成分指偶联物的活性部分（如抗体）。

检测次数与活性成分有何关系？

每孔偶联物的平均量反映了整体生物材料含量。通常优先使用活性成分的量，而非偶联物的总量。对于 Cryptate 和 d2 偶联物，偶联物总量等于活性成分的量，因为标记物的分子量可忽略不计。但 XL665 标记实体并非如此，其偶联物总量会因 XL665 偶联物的最终摩尔比而变化，不过 Revvity 提供的活性成分量是恒定的，且基于所订购的检测次数。

HTRF 偶联物中的活性成分

Cryptate 和 XL665 偶联物的推荐用量

Cryptate 偶联物的用量不宜过多，以避免读数仪饱和和背景水平过高。在大多数情况下，1 至 5nM 的 Cryptate 浓度较为合适，根据所使用的 HTRF 兼容读数仪，在 620nm 处可产生 20,000 至 80,000cps 的信号。XL665 偶联物必须与其检测对应物尽可能匹配，以使最大数量的生物分子被 XL665 受体标记。因此，若要检测浓度为 20nM 的标记分子，抗标签 - XL665 的浓度应与之等摩尔或更高。

规格

其他规格

应用：蛋白质 - 蛋白质相互作用
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：荧光试剂
运输条件：常温运输
目标类别：结合检测
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：心血管疾病、传染病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
单位规格：20,000 个检测点

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货号：610SADLB

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