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HTRF MAB ANTI FLAG M2-XL665 - 5K PTS 天冬氨酸序列XL665测量试剂 - 5，000测试

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品牌： Revvity

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概述

单克隆抗 FLAG M2-XL665（MAb Anti FLAG M2-XL665）是一种 IgG1 抗体，以 XL665 标记的 FLAG® 融合蛋白为抗原制备而成。与抗 FLAG®M1 抗体不同，M2 抗体可识别 FLAG® 融合蛋白 N 端或 C 端的 FLAG® 序列。

该试剂可用于生化和细胞层面的多种相互作用研究，包括：蛋白质 / 蛋白质、蛋白质 / 肽、蛋白质 / DNA、蛋白质 / RNA、蛋白质 / 碳水化合物、蛋白质 / 小分子、受体 / 配体相互作用。

HTRF 技术可检测从皮摩尔到低毫摩尔范围的广泛亲和常数。

工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中，一个结合伙伴被直接或间接标记供体，另一个则被标记受体（同样直接或间接）。信号强度与两个结合伙伴的结合量成正比。本示例中：单克隆抗 FLAG M2-XL665 与 FLAG M2 标签的伙伴 A 结合，而伙伴 B * 与标记 HTRF 供体的特异性抗体结合。* 伙伴 B 也可被生物素化、标记标签、Fc 融合，此时需使用相应的 HTRF 试剂（抗标签、抗种属、Protein A、链霉亲和素）标记供体进行检测。

检测流程

右侧示例描述了终体积为 20 µL 的检测流程，用于检测 FLAG M2 标签的伙伴 A 与非标签伙伴 B * 的相互作用：

加入两种伙伴分子（各 10 µL）并孵育；
加入单克隆抗 FLAG M2-XL665（5 µL）和供体标记的抗伙伴 B 抗体（5 µL）；
孵育后读取数据。
* 伙伴 B 也可被生物素化、标记标签、Fc 融合或直接标记，此时需使用相应的 HTRF 试剂（抗标签、抗种属、Protein A、链霉亲和素）标记供体进行检测。

检测详情

为特定应用构建 HTRF 相互作用检测

试剂按检测次数（20 µL 反应体系）销售。偶联 XL665 或 d2 的抗体按每孔 20 ng 抗体的标准供应。每个小瓶中活性成分的量（以及每个小瓶中示踪物的数量）也会提供（详见产品说明书）。活性成分指偶联物的活性部分（如抗体）。

检测次数与活性成分的关系

每孔的平均偶联物量反映整体生物材料含量。通常优先使用活性成分量而非总偶联物量。对于穴状化合物（Cryptate）和 d2 偶联物，总偶联物量等于活性成分量，因为标记物的分子量可忽略不计。但 XL665 标记物不同，其总偶联物量会随 XL665 偶联物的最终摩尔比变化，而 Revvity 提供的活性成分量基于订购的检测次数保持恒定。

基序 / 物种	抗体	5,000 次检测的活性成分	物种及亚型	特异性
FLAG®	单克隆抗体 M2	5-10 µg	小鼠 IgG1	DYKDDDDK 肽

穴状化合物（Cryptate）与 XL665 偶联物的推荐用量

穴状化合物偶联物用量不可过量，以免导致读数仪饱和和背景过高。多数情况下，1–5nM 的穴状化合物浓度较为合适，根据所用的 HTRF 兼容读数仪不同，可在 620nm 处产生 20,000–80,000 cps 的信号。
XL665 偶联物需尽可能与检测对应物匹配，以最大化 XL665 受体标记的生物分子数量。例如，检测浓度为 20nM 的标签分子时，抗标签 - XL665 的浓度应等摩尔或更高。

规格

其他规格

应用：蛋白质 - 蛋白质相互作用
品牌：HTRF
检测方式：HTRF
产品类别：荧光试剂
运输条件：常温运输
靶标类别：结合检测
技术：时间分辨荧光共振能量转移（TR-FRET）
治疗领域：心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
单位规格：5,000 次检测

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货号：61FG2XLA

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