登录 注册 购物车 13310039714

当前位置:首页 > 产品中心 > Revvity 均相检测试剂 > HTRF PAB ANTI HUMAN IGG-TB - 20K PTS 免疫球蛋白Tb检测试剂 - 20,000测试

概述


山羊抗人免疫血清中的 IgG 经过免疫纯化后标记了铽(Tb)。多克隆抗人 IgG - 铽穴状化合物(PAb Anti Human IgG-Tb cryptate)可用于检测未标记的人特异性抗体与靶分子或 Ig 融合蛋白的结合。


该试剂可用于生化和细胞层面的多种相互作用研究,包括:蛋白质 / 蛋白质、蛋白质 / 肽、蛋白质 / DNA、蛋白质 / RNA、蛋白质 / 碳水化合物、蛋白质 / 小分子、受体 / 配体相互作用。


HTRF 技术可检测从皮摩尔到低毫摩尔范围的广泛亲和常数。


工作原理

检测原理

在 HTRF 相互作用检测中,一个结合伙伴被直接或间接标记供体,另一个则被标记受体(同样直接或间接)。信号强度与两个结合伙伴的结合量成正比。本示例中:多克隆抗人 IgG - 铽穴状化合物与含有人 Fc 融合标签的伙伴 A 结合,而伙伴 B * 与标记 HTRF 受体的特异性抗体结合。* 伙伴 B 也可被生物素化、带标签、Fc 融合,此时需使用相应的 HTRF 试剂(抗标签、抗种属、Protein A、链霉亲和素)标记受体进行检测。


检测流程

右侧示例描述了终体积为 20 µL 的检测流程,用于检测含有人 Fc 融合标签的伙伴 A 与非标签伙伴 B * 的相互作用:


  1. 加入两种伙伴分子(各 10 µL)并孵育;
  2. 加入多克隆抗人 IgG - 铽穴状化合物(5 µL)和受体标记的抗伙伴 B 抗体(5 µL);
  3. 孵育后读取数据。
    * 伙伴 B 可被生物素化、带标签、Fc 融合或直接标记,此时需使用相应的 HTRF 试剂(抗标签、抗种属、Protein A、链霉亲和素)标记受体进行检测。


检测详情

检测次数与活性成分的关系

每孔的平均偶联物量反映整体生物材料含量。通常优先使用活性成分量而非总偶联物量。对于穴状化合物(Cryptate)和 d2 偶联物,总偶联物量等于活性成分量,因为标记物的分子量可忽略不计。但 XL665 标记物不同,其总偶联物量会随 XL665 偶联物的最终摩尔比变化,而 Revvity 提供的活性成分量基于订购的检测次数保持恒定。


穴状化合物(Cryptate)与 XL665 偶联物的推荐用量

  • 穴状化合物偶联物用量不可过量,以免导致读数仪饱和和背景过高。多数情况下,1–5nM 的穴状化合物浓度较为合适,根据所用的 HTRF 兼容读数仪不同,可在 620nm 处产生 20,000–80,000 cps 的信号。
  • XL665 偶联物需尽可能与检测对应物匹配,以最大化 XL665 受体标记的生物分子数量。例如,检测浓度为 20nM 的标签分子时,抗标签 - XL665 的浓度应等摩尔或更高。


规格


其他规格

  • 应用:蛋白质 - 蛋白质相互作用
  • 品牌:HTRF
  • 检测方式:HTRF
  • 产品类别:荧光试剂
  • 运输条件:干冰运输
  • 靶标类别:生物制品
  • 靶标物种:人类
  • 技术:时间分辨荧光共振能量转移(TR-FRET)
  • 治疗领域:心血管疾病、感染性疾病、炎症、代谢 / 糖尿病、非酒精性脂肪性肝炎 / 肝纤维化、神经科学、肿瘤与炎症、罕见病
  • 单位规格:20,000 次检测


    没有数据
    没有数据
    没有数据